精神神经疾病患者脑组织中BDV感染及相关因子的检测与BDV中国株分离

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博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是单负链RNA病毒目博尔纳病病毒科的原型病毒,具有严格的嗜神经性,几乎能感染所有的温血动物,并表现为兴奋、嗜睡、共济失调等精神神经异常,严重可致死亡。近年发现,BDV感染可能与人类某些精神神经疾病如精神分裂症、癫痫、慢性疲劳综合症等有关。 为进一步探讨BDV感染在精神神经疾病中的作用与可能机制,本文用免疫组化法和原位杂交法对精神分裂症和正常对照尸检脑海马、杏仁核组织中BDV抗原和核酸进行检测,并把脑组织分为BDV阳性海马组、BDV阴性海马组、BDV阳性杏仁核组和BDV阴性杏仁核组;进而对上述分组脑组织中的组织因子(TF)、生长相关蛋白-43(GAP-43)和神经肽Y(NPY)3个BDV感染相关的因子,以及精神分裂症相关的多巴胺受体D2(DRD2)的蛋白质表达情况进行检测,并比较分析,获得如下结果。(1)精神分裂症脑组织中BDV抗原和核酸的检测阳性率明显高于正常对照;(2)在正常对照脑组织中,BDV感染海马区TF和GAP-43的表达增加,NPY表达降低,但DRD2表达没有明显改变;BDV感染杏仁核区TF、NPY、GAP-43和DRD2表达均没有显著差异,提示TF、NPY和GAP-43可以在一定程度上反映BDV的感染情况,但受感染部位的影响;(3)与正常对照脑组织相比,精神分裂症海马区TF和DRD2的表达增加,NPY和GAP-43表达降低;杏仁核区TF和DRD2表达增加,而NPY、GAP-43表达没有显著差异,提示除DRD2之外的TF、NPY和GAP-43也可以作为判定精神分裂症的指标;(4)在精神分裂症脑组织中,BDV感染海马区TF表达降低,NPY表达增加,但GAP-43和DRD2表达没有明显改变;BDV感染杏仁核区TF、NPY、GAP-43和DRD2表达均没有显著差异,提示BDV可能通过调节TF和NPY表达,参与精神分裂症的发病过程,并且与DRD2异常无关;(5)BDV感染对TF、NPY和GAP-43等因子表达的影响,在不同物种、疾病以及脑组织部位中有一定差异,可能反映脑组织受损伤的情况;(6)首次证明在疾病情况下的人脑组织神经元中可以表达TF。同时,收集神经疾病患者术后脑组织样本进行BDV标志检测,并将BDV阳性人脑组织匀浆接种于大鼠脑内,进而选择接种后BDV阳性的大鼠脑组织接种BDV敏感细胞,以分离人源BDV,结果获得了3株BDV持续感染的细胞系,可以持续检测到BDV RNA的存在,但BDV抗原的表达检测不到,推测BDV可能是处于低表达或相对静止状态。本研究结果进一步证实,BDV感染与精神分裂症等精神神经疾病有关,并可能通过影响DRD2以外的TF、NPY等因子的表达参与疾病过程,而且TF是反映BDV感染与精神分裂症的重要因子。人源BDV感染细胞系的建立,为分析中国BDV感染与病毒学特征等奠定了基础。
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