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研究背景铁线莲属（Clematis）植物属毛茛科（Ranunculaceae）,在我国分布广泛,化学成分复杂,在民间主要用于风湿风寒、疼痛感染等疾病的治疗。甘青铁线莲（Clematis tangutica）为铁线莲属植物的一种,主要分布于我国西部地区,在藏医药中用于治疗活血通瘀和消化不良等病症。课题组前期对甘青铁线莲中的皂苷和黄酮类成分进行系统分离鉴定,并对得到的物质进行了活性筛选,发现其中一种黄酮苷成分—芹菜素-7-O-β-D-（-6’’-p-香豆酰基）-吡喃葡萄糖苷（APG）具有明显的抗氧化活性。目前,关于APG心血管保护作用及机制的研究已经取得进展,关于其脑保护作用的研究正在推进,并已在动物实验中得到验证,具备进一步开发为治疗药物的可能性。本课题主要从提取和合成两个方面对APG的制备工艺进行优化和探索,并对合成产物的脑保护作用进行验证,为APG的生产和研究提供了一定理论和实验依据。方法1.响应面法优化超声提取甘青铁线莲总黄酮工艺:在乙醇体积分数、提取时间、液料比三个单因素实验的基础上,对总黄酮提取率建立Box-Behnken中心组合实验设计,模拟二次回归模型,通过响应面分析,对超声提取甘青铁线莲总黄酮工艺进行优化。2.化学合成活性成分APG:通过查阅文献和实验探索,设计了以芹菜素、乙酰溴代葡萄糖、香豆酸乙烯酯为起始原料的APG合成路线,并对催化剂、溶剂等反应条件进行了实验比较,在此基础上合成目标产物APG。3.合成产物的脑保护作用研究:建立大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型,分为假手术组、缺血模型组、溶剂组、阳性对照组（r-tPA）、产物干预组。通过观察实验大鼠的神经行为学评分及TTC染色脑梗死面积,对合成产物芹菜素-7-O-（-6’’-p-香豆酰基）-吡喃葡萄糖苷的脑保护作用进行验证。结果1.响应面法优化超声提取甘青铁线莲总黄酮工艺:通过模型分析和可行性修正,发现乙醇体积分数对于总黄酮提取率影响最为显著,得到最佳提取条件为乙醇体积分数80%,提取时间44 min,液料比30.5:1,最大提取率可达1.266%。2.化学合成活性成分APG:通过比较实验,确定第三步反应采用Lipolase 100T脂肪酶作为催化剂、CH3CN作为溶剂、反应时间为76h,采用黄酮特征反应、ESI-MS,结合1H-NMR和13C-NMR等理化数据验证合成结果,最终芹菜素-7-O-（-6’’-p-香豆酰基）-吡喃葡萄糖苷合成产率为42.27%。3.合成产物的脑保护作用研究:与MCAO组相比,合成产物干预组大鼠神经行为学评分显著升高,脑梗死面积显著减少（P<0.05）,表明通过此合成路线得到的APG具有脑保护作用。结论本课题利用响应面、催化合成等方法分别从提取和合成两方面对于甘青铁线莲中活性成分APG的制备工艺进行了探索和优化,利用大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型验证了合成反应中产物的脑保护作用,对于APG的量化生产提供了实验依据,为甘青铁线莲的开发利用以及心脑血管新药进一步研发提供了理论和实验基础。