甘草提取物(GC-3)体外诱导Hela细胞凋亡及机制研究

• 作 者: 商潇云
• 机 构: 哈尔滨医科大学
• 出 处: 哈尔滨医科大学
• 发表日期: 2014年期
• 关键词: 宫颈肿瘤 中药治疗 甘草提取物 临床药理

目的：采用肿瘤细胞增殖抑制作用为导向的化学分离方法，从甘草中分离提取得到甘草提取物(GC-3)。探讨了GC-3体外对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用，分析GC-3在诱导凋亡过程中对PARP-1的表达调控作用，为GC-3的进一步研究与开发提供科学依据。　　方法：通过水煮、乙醇沉淀、大孔吸附树脂柱层析，分离提取得到GC-3;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GC-3对HeIa细胞增殖的影响;透射电镜观察GC-3诱导Hela细胞凋亡的形态学改变;Western Blot测定25μ g/mL GC-3不同时间作用于Hela细胞，以及不同浓度GC-3作用于Hela细胞24h后凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶（PARP）表达水平的变化。　　结果：MTT检测结果表明，GC-3能够抑制HeLa细胞增殖且呈现出良好的时间剂量效应关系，其中GC-3和阳性对照组顺铂作用于人Hela细胞12h、24h和48h的半数抑制浓度(IC50)分别为35.21μg/mL、17.05μg/mL、12.07μ g/mL和20.48μg/mL、7.34μg/mL、8.66μg/mL。透射电镜检测可见典型的凋亡细胞的形态学特点。Western Blot检测结果显示，经GC-3(25μg/mL)不同时间作用Hela、细胞，以及不同浓度GC-3作用后，均有促进PARP-1裂解的作用，并可检测到裂解片断。　　结论：GC-3在体外可明显抑制HeLa细胞的增殖和诱导HeLa细胞凋亡，PARP-1在GC-3作用Hela细胞的诱导其凋亡的分子机制中起重要作用。