雪松性别决定的细胞学机理及花粉生物学特性研究

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雪松[Cedrus deodara (Roxb.) G. Don],松科,雪松属。松科共十属,大部分为球花单性,雌雄同株。雪松属有四个种即雪松,黎巴嫩雪松,短叶雪松和北非雪松,它们分别间断的分布于喜马拉雅、亚洲西部、塞普路斯及北非等地。其中,雪松雌雄异株,稀同株,是研究松科性别分化机理的好材料。雪松为重要园林绿化树种,由于花期不一致及花粉撒粉期污染空气,使人过敏。因此,对花粉的生物学及早期性别鉴定进行研究具有重要的实践意义。本文对不同性别株雪松核型、雪松的性别比例及花粉的生物学特性做了系统研究,其一旨在探讨雪松在细胞学水平上的性别决定机理和早期性别鉴定,其二研究雪松花粉的生活力状况,搞清雪松花粉萌发的适宜培养基、培养温度及不同贮藏条件和不同贮藏期对花粉生活力的影响,以期做好雪松花粉的人工授粉工作,为雪松的遗传育种工作提供良好的技术支撑。⑴对不同性别株雪松分别作核型分析,从细胞学水平上探讨雪松的性别决定机理。①雪松核型分析选取茎尖部位,取材方法方便、快捷。②对雪松茎尖进行预处理,选用药品对二饱和氯苯。为了得到效果较好的染色体,设定三个不同的预处理时间段,结果表明预处理八小时以上者为佳。③雪松雌株、雄株、雌雄同株染色体均为24条,即2n=24,未见染色体非整倍性和多倍性变异现象,也未见B染色体。④不同性别株雪松都是由中部(m)、近中部(sm)着丝粒染色体组成,没有近端部(st)着丝粒类型的染色体存在。核型公式皆为K(2n)=24=18m+6sm,其中10、11、12对染色体具有近中部着丝粒,其余为中部着丝粒染色体。⑤雪松雌株、雄株、雌雄同株均在第1、2、9号染色体的短臂上有随体,但雄株的第9对2染色体中仅有一条染色体具有随体。研究显示第9对染色体可能与性别分化有关。⑥雪松不同性别株的平均臂比,染色体长度比相差不大,但也有区别。雪松雄株的平均臂比大于雌株,雌株大于雌雄同株。而染色体长度比,雄株大于雌株,雌株大于雌雄同株。根据平均臂比反应其原始性,染色体长度比反应其核型的对称性,得出雪松不同性别株之间的进化性从原始到进化:雌雄同株→雌株→雄株。⑵对雪松雄株、雌雄同株的花粉进行生活力及储藏条件研究。①从花粉生活力上不能看出性别差异,即花粉研究不能解决雪松的性别决定机理。②在撒粉盛期采集的花粉萌发率要高于未开放、刚刚开放、及撒粉末期。花粉的采集时间集中在上午9:00-14:00,下午采集也可以。采集是选用密封较好的纸袋。③花粉萌发的最佳温度为20℃;最适宜的培养基为培养基Ⅱ-10%蔗糖+2%琼脂+0.01%硼酸。④雪松花粉的最佳贮藏条件为冷藏、干燥。不同的贮藏条件及贮藏期与花粉生活力有明显的关系。随着贮藏期的延长生活力主要呈下降趋势。在不同的贮藏条件及贮藏期,生活力变化情况不尽相同,以4℃冷藏花粉生活力的下降速度最慢,室内黑暗条件下贮藏,花粉生活力下降最快,一个月左右几乎为零,室温自然条件保存的花粉生活力下降次之。冷藏条件下贮藏,3个月后仍保持较高萌发率,一年后仍有一定的生活力。综合花粉生活力研究,影响花粉萌发率的重要因子为:培养温度、培养基类型以及花粉的贮藏条件和贮藏时期。⑶雪松球花在树体上的分布规律。研究表明,雪松雄球花在树冠不同方向的水平分布上存在差异,南部树冠球花分布最多。在垂直分布上也存在差异,主要分布在树冠中下部,其中中部分布量最大。雌球花主要分布在树冠的中上部。雪松的传粉机制主要以风作为媒介。⑷通过对泰城成龄雪松进行性别比例调查发现:①泰城成龄雪松多数分布在校园老校区、医院、政府大院、修筑较早的街道。②泰城雪松雌株与雄株的比例近1:1,雌雄同株的比例较高,近20%。③在性别株调查的过程中,发现小孢子顶端生长针叶的现象。
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