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目的:Y-box结合蛋白1(Y-box binding protein-1,YB-1)是一种多功能蛋白,其在多种肿瘤中存在异常表达。本研究拟阐明YB-1表达异常与肝内胆管癌患者临床病理参数以及预后的关联;研究YB-1下调对胆管癌细胞增殖的影响和机制;探索YB-1过表达对肝内胆管细胞癌多药耐受性形成的影响及其机制。方法:采用免疫组织化学方法检测29例肝内胆管癌组织中YB-1的表达,评价YB-1不同细胞定位表达与各项临床病理参数及患者预后之间的关联。使用YB-1siRNA干扰肝内胆管癌细胞株(HCCC-9810和TKF-1)中YB-1表达,采用MTT检测细胞增殖的改变,Real-time PCR和Western blot检测细胞增殖指标以及细胞周期相关蛋白变化。MTT检测肝内胆管癌细胞株YB-1过表达后对吉西他滨的化疗敏感性改变,并进一步检测多药耐受相关基因转录水平改变。结果:YB-1在肝内胆管癌组织中阳性率高达75.9%,其中31.0%的组织中还存在YB-1胞核阳性表达。相关分析显示,YB-1胞浆阳性组肝内胆管癌患者术前存在肿瘤转移和肿瘤微卫星病灶几率增加的风险。而YB-1胞核阳性与患者肿瘤原发灶分期(P=0.033)、血管侵犯(P=0.017)、术后肿瘤转移(P=0.011)和临床分期增加(P=0.043)呈正相关。生存分析显示,YB-1高表达患者有预后不佳的趋势,尤其是YB-1胞核阳性患者中位无病生存期仅16月(P=0.1867),总生存期仅19月(P=0.0001)。YB-1表达下调后胆管癌细胞增殖能力受到明显抑制。进一步检测显示p21蛋白表达上调,而细胞增殖指标PCNA和Ki67表达下降。细胞周期蛋白检测显示,磷酸化CDK和Cyclin D1表达水平也降低,而E2F1表达未改变。细胞周期检测显示,细胞周期阻滞于G0/G1期。过表达YB-1后肝内胆管癌细胞株对吉西他滨敏感性明显降低。Real-time PCR检测显示MDR1和MRP1转录水平升高。结论:肝内胆管癌组织中YB-1高表达,尤其是胞核阳性表达与肿瘤病情进展相关,且是患者预后不良的预测因子。YB-1抑制胆管癌细胞株增殖是通过上调p21蛋白产生的,并能引起细胞周期阻滞的发生。YB-1还可能通过上调MDR1和MRP1增加肝内胆管癌细胞株多药耐受性。