FNS与共移植体对移入MCAO模型大鼠的NSCs增殖、凋亡的影响

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目的: (1)本实验通过由神经干细胞、基质、脑微血管内皮细胞构建的其移植体植入缺血/再灌注鼠脑内的纹状体区,观察神经干细胞增殖与凋亡的情况。 (2)通过整体干预(小脑顶核刺激),观察共移植体中神经干细胞在缺血/再灌注鼠脑内的纹状体区的增殖、凋亡情况。为患有脑血管病的患者期望找到好的方法,通过这种方法不仅使他们的神经细胞得到再生的可能,而且对其结构尽快修复,功能的尽快整和起到很大的作用。 方法:同一基因背景鼠80只,体重300-350克,雄性6月龄,通过线栓法制备大脑中动脉局灶脑缺血/再灌注模型(MCAO模型),随机分为(1)正常对照组(3、7、14、60d4个时间点,每个时间点2只);(2)神经干细胞+小脑顶核刺激组;(3)共移植体组;(4)共移植体+小脑顶核刺激组(3、7、14、60d 4个时间点,每个时间点6只)。用小脑顶核刺激仪作线栓模型操作前刺激1小时。于模型制各完后24小时用立体定位仪分别将共移植体及神经干细胞(被Brdu标记),注入鼠脑的纹状体区。通过TTC染色和HE染色来了解脑梗塞后脑组织的病理学变化判断模型制备情况。通过免疫组织化学和免疫荧光方法检测Brdu阳性细胞随时间点和干预手段不同的表达变化,了解共移植体和/或小脑顶核刺激后神经干细胞增殖和凋亡情况。通过显微图像分析系统对阳性结果进行分析。 结果: (1)移入脑内的共移植体组的神经干细胞增殖数目优于神经干细胞组:凋亡率低于神经干细胞组; (2)共移植体组+小脑顶核刺激组增殖数目各时间点均好于共移植体组、神经干细胞+小脑项核刺激组;凋亡率低于共移植体组、神经干细胞+小脑顶核刺激组。 (3)共移植体组+小脑顶核刺激组增殖、共移植体组增殖率7天增高,14天达高峰,60天下降。凋亡率3、7天无显著差异,14天与3、7天比差异显著,60天与14比差异显著,凋亡的细胞更少。 结论: 1.共移植体适合体内移植治疗大鼠脑缺血再灌注模型,并在各方面表现出优于单纯干细胞移植。 2.整体干预(小脑顶核刺激)下,更能促进共移植体中神经干细胞的增殖、抑制其凋亡。
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