OX40L和ICAM-1在子痫前期患者外周血中的表达水平及意义

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目的:子痫前期(Preeclampsia,PE)是妊娠期特有的疾病,该疾病严重影响了母儿健康,是孕产妇及围产儿病率及死亡率增高的主要原因,至今仍是围产医学研究的重点。子痫前期病因至今未明,对于该病临床上也缺乏有效的预防和治疗手段,只有终止妊娠才能彻底解决此疾病。随着对子痫前期疾病的认识及研究,有很多学说已被提出,包括免疫学说、氧化应激学说等,子痫前期的免疫学机制逐渐被认识,目前已成为子痫前期机制研究中的重点。免疫机制是由机体内各种免疫器官、免疫细胞和免疫因子介导的。近年来研究发现OX40/OX40L在众多免疫疾病中起重要作用,ICAM-1是细胞内信号转导中重要分子,是免疫机制中不可或缺的角色。本文通过检测子痫前期患者外周血中OX40L和ICAM-1两因子的水平,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法:选取2014年4月至2014年8月在山西医科大学第一医院产科住院治疗的重度子痫前期患者40例(即重度子痫前期组),同期住院分娩的正常妊娠晚期孕妇35例(即对照组)。重度子痫前期的诊断标准根据八版教科书的诊断标准诊断,并且为单胎妊娠,无妊娠期糖尿病,妊娠合并亚甲减等相关妊娠合并症,无高血压史、肾病史与糖尿病史。两组研究对象均于治疗及分娩前空腹抽取静脉血5ml,用离心机以2000r将抽取的静脉血离心15min后分离出血清,将血清保存于-20℃冰箱待测。测定因子时采用ELISA法测定。实验过程为:用被ICAM-1单克隆抗体预包被过的酶标板为反应皿,将样本血清和标准品经过稀释到特定浓度后加入酶标板中。样本血清和标准品中的ICAM-1就会与ICAM-1单克隆抗体结合,洗去其中的游离成分;加入生物素化的ICAM-1抗体,ICAM-1抗体与结合在单抗上的ICAM-1结合形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记过的亲和素,使得生物素与亲和素特异性结合,洗去未结合的成分;向其内加入显色剂,若酶标板孔中有ICAM-1,标记物辣根过氧化物酶会使无色的显示剂现蓝色;反应一段时间后加入终止液使得显示剂变黄。酶标板在450nm下测OD(吸光度)值,酶标孔中ICAM-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制相关标准曲线计算得出样本血清中ICAM-1浓度。测定血清中OX40L同理。本实验试剂由上海西唐生物科技有限公司与北京四柏生物科技有限公司提供。结果:在重度子痫前期组和对照组中,用ELISA方法均检出了OX40L和ICAM-1,提示这两个因子在两组中均有表达;OX40L的表达在重度子痫前期组与对照组比较,存在统计学意义(t=14.6 P<0.05),提示OX40L在重度子痫前期患者外周血中表达增强。ICAM-1的表达在重度子痫前期组与对照组比较,存在统计学意义(t=40.7P<0.05),提示ICAM-1在重度子痫前期患者外周血中表达增强。结论:OX40L的表达在重度子痫前期组与对照组比较,存在统计学意义,提示OX40L可能参与重度子痫前期的发病。ICAM-1的表达在重度子痫前期组与对照组比较,存在统计学意义,提示ICAM-1可能参与重度子痫前期的发病。
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