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在本课题中,我们制备了一种与传统抗肿瘤药物截然不同的纳米粒子—[Gd@C82(OH)22]n,它是一种羟基化金属内包的富勒烯分子,具有极好的生物相容性,在前期研究中发现,[Gd@C82(OH)22]n在远低于常规临床用药的浓度下即对H22肝癌及MCF-7乳腺癌荷瘤鼠的肿瘤生长有显著的抑制作用,且毒性明显减弱。本课题的目的是在已有动物实验结果的基础上,进一步明确[Gd@C82(OH)22]n的分子和细胞作用机理。 本课题通过研究在纳米粒子[Gd@C82(OH)22]n作用下,乳腺癌细胞株MCF-7及正常内皮细胞株ECV304在形态、生长、功能以及基因表达调控等方面的变化,揭示[Gd@C82(OH)22]n的抗肿瘤机制,通过CCK-8检测[Gd@C82(OH)22]n的细胞毒性;流式细胞仪分析细胞周期;为全面分析对[Gd@C82(OH)22]n作用对细胞的影响,利用芯片对[Gd@C82(OH)22]n作用的MCF和ECV304细胞进行全基因组分析,并对细胞周期、细胞骨架、转运等多个功能的相关基因进行RT-PCR、westernblot和免疫组化的验证。 实验结果表明[Gd@C82(OH)22]n可以引起细胞周期G0/G1期阻滞,通过基因芯片的研究则显示可以使包括细胞周期、凋亡及线粒体等多个细胞功能及细胞器的相关基因表达发生改变,通过选取部分基因进行验证,结果与芯片结果相符;此外还进一步对[Gd@C82(OH)22]n作用后表达明显下调的cyclinD2基因进行siRNA干扰实验,结果显示cyclinD2基因表达降低可引起细胞的G0/G1期阻滞。 通过以上研究,证实可[Gd@C82(OH)22]n通过G0/G1期阻滞抑制细胞生长从而达到抑制肿瘤的目的;此外,[Gd@C82(OH)22]n作用下还可引起细胞上千基因发生表达改变,具体影响还需进一步探讨。