硒蛋白与大鼠心肌损伤关系的实验研究

• 作 者: 陈洁
• 机 构: 哈尔滨医科大学
• 出 处: 哈尔滨医科大学
• 发表日期: 2009年期
• 关键词: 硒蛋白 维生素E 抗氧化 心肌损伤 实时荧光定量PCR

目的：研究硒蛋白与大鼠心肌损伤的关系。
方法：40只健康雄性Wistar大鼠，按体重随机分为四组，每组10只：(A)低硒低蛋白低维生素E组；(B)低硒低蛋白常维生素E组：(C)常硒常蛋白低维生素E组；(D)常硒常蛋白常维生素E组。饲养六个月后处死，测定各组大鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活力；测量心脏质量指数；光镜、电镜下观察心肌细胞病理改变和心肌坏死率；提取心肌组织总RNA，采用实时荧光定量PCR方法检测硒蛋白mRNA表达水平；westernblot方法检测硒蛋白P的蛋白表达水平。
结果：低硒低蛋白组GSH—Px活力明显低于常硒常蛋白组，差异有统计学意义(P<0.05)；各组大鼠心脏质量指数均有差异，差异有统计学意义(P<0.01)。低硒低蛋白组心脏质量指数高于常硒常蛋白组：各组均检出不同程度的心肌坏死病变，病变的性质主要为灶状凝固型坏死，伴少量炎性细胞浸润；心肌坏死率低硒低蛋白低维生素E(A)组坏死率最高，常硒常蛋白常维生素E(D)组最低；各组间差异有统计学意义(P<0.01)。大鼠心肌组织Gpxl、Se W的mRNA表达水平C、D组(常硒常蛋白)明显高于A、B组(低硒低蛋白)，差异有统计学意义(P<0.05)；Gpx4的mRNA表达水平低硒低蛋白低维生素E(A)组高于常硒常蛋白低维生素E(C)组，差异有统计学意义(P<0.05)。Txnrd、Sep P的mRNA表达水平各组差异均无统计学意义(P>0.05)。Se P的蛋白表达水平出现显著差异(P<0.001)，常硒常蛋白常维生素E(D)组最高。
结论：补充硒和VE能够增强机体抗氧化能力，防止脂质过氧化损伤；保护心肌细胞。在体内，硒通过硒蛋白发挥抗氧化作用，硒缺乏时，硒蛋白合成减少，mRNA稳定性降低，发生降解，抗氧化能力降低，自由基损伤心肌细胞，导致心肌坏死。Gpx1和Se W的mRNA水平极其稳定性与硒水平密切相关，补硒可以明显提高Gpx1、Se W水平，增强机体抗氧化能力，减轻心肌损伤；Gpx4、Se P和Txnrd的mRNA及其稳定性受硒水平影响较小；硒缺乏时，其mRNA降解程度较低，仍能够保持较好的稳定性，发挥抗氧化作用；但是Se P的蛋白表达水平与硒水平影响密切相关。