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本研究从福建永泰县温泉的水样、土样及木料样品中分离到60株嗜热细菌。采用菌体全蛋白SDS-PAGE和16S rDNA序列分析结合的鉴定方法,将它们归类为8种细菌,分属于五个属中的八个种:Geobacillus stearothermophilus、Geobacillus kaustophilus、Goobacillus thermocatenulatus、Goobacillusthermoleovorans、Anoxybacillus kualawohkensis、Thermus sp.、Moiothermussp.、Aranicola sp.。嗜热微生物及其嗜热酶在工业和分子生物学等方面有重要的用途。在能源逐渐枯竭的今天,纤维素酶的研究对利用纤维素这一具有巨大潜力的可再生资源有着重要的意义。本研究筛选到2株产胞外纤维素酶嗜热菌DT-M7和TC-S8,经鉴定分别为酸热脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillusacidocaldarius)和嗜热芽孢杆菌(Goobacillus sp.)。对Geobacillus sp.菌株TC-S8产胞外纤维素酶的发酵条件进行研究,结果表明:在培养基的初始为pH6.5,温度为60℃,装液量20%,接种量2%,摇床转速为120r/min的条件下培养36h时,产酶量达到最大。菌株TC-S8分泌的纤维素酶最适作用温度为60-70°C,最适pH为7.0。利用HPLC法分析纤维素酶降解产物,发现其中主要为葡萄糖,含有少量纤维二糖,葡萄糖是由β-葡萄糖苷酶将纤维二糖水解的产物,说明菌株TC-S8除了分泌内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶,还分泌β-葡萄糖苷酶,构成复合的纤维素酶体系。菌株TC-S8的β-葡萄糖苷酶GL基因克隆结果表明,该DNA片段长1415nt。最大开放阅读框编码470个氨基酸。该序列与Geobacillus kaustophilus HTA426和嗜热脱氮芽孢杆菌NG80-2(Goobacillus thermodenitrificans N680-2)的β-葡萄糖苷酶基因序列同源性分别达到90%和89%。利用系统发育树分析,菌株TC-S8的GL序列、Geobacillus kaustophilus HTA426和Geobacillusthermodenitrificans NG80-2的β-葡萄糖苷酶基因序列处于同一分支上。该基因的克隆,为构建降解纤维素的工程菌奠定基础。