三七总甙单体成分Rg1、Rb1抗大鼠肝纤维化的实验研究

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目的用三七总甙单体成分人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1治疗实验性肝纤维化大鼠,观察人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1抗肝纤维化的作用。方法健康SD大鼠随机分为10组,分别为Rg1高剂量组(120mg/kg/d)、中剂量组(60mg/kg/d)、低剂量组(30mg/kg/d),Rb1高剂量组(120mg/kg/d)、中剂量组(60mg/kg/d)、低剂量组(30mg/kg/d),三七总甙组(60mg/kg/d),秋水仙碱组(0.2mg/kg/d),生理盐水组,正常对照组。除正常对照组外,其余各组均采用于CCl4皮下注射制备肝纤维化模型,模型组(生理盐水组)在制备模型的同时给予皮下注射生理盐水1ml/d,其余各组在造模同时给予皮下注射相应的治疗药物(剂量如前述),每日一次。于注射第一周随机每组选择一只处死,于第二周及第三周随机每组雌、雄各选择一只处死,取肝脏组织镜检以观察肝纤维化形成的进程,每组共处死5只。5周后造模成功全部处死。观察各组大鼠的一般情况,行为及体重变化;取大鼠肝脏组织进行HE染色、Masson三色染色和银染,进行肝纤维化分期和肝脏炎症活动度分级,并在电镜下观察肝脏组织的超微结构变化;测定血清肝功能指标和肝纤维化血清学指标;半定量RT-PCR检测肝脏组织TIMP-1、Collagen(α1)ImRNA的表达。结果①至实验结束时Rb1高剂量组死亡3只,三七总甙组和秋水仙碱组各死亡一只,其余各组全部存活。Rb1各剂量组大鼠的一般状况较正常对照组差,与生理盐水组无明显差别;Rg1各剂量组、三七总甙组、秋水仙碱组大鼠的一般状况较生理盐水组好,与Rb1各剂量组比较也较好。②实验后各组大鼠的体重存在差异,部分有统计学意义(P<0.05)。③各组大鼠的肝纤维化分期的比较,组间存在差异(P<0.05或P<0.01)。各组大鼠的肝脏炎症活动度分级的比较,组间有差异(P<0.05或P<0.01)。④各组肝功能指标组间存在差异(P<0.05或P<0.01),各组肝纤维化血清学指标组间存在差异(P<0.05或P<0.01)。⑤各组大鼠肝细胞线粒体体视学结果比较组间存在差异(P<0.05或P<0.01)。⑥各组大鼠肝脏组织中TIMP-1、Collagen(α1)ImRNA的表达组间存在差异(P<0.05或P<0.01)。结论:1.CCl4肝纤维化模型是一种简便、易行、价廉的实验模型。2.三七总甙单体成分人参皂苷Rb1不具有抗肝纤维化的作用,不是三七总甙抗肝纤维化的有效成分,并且具有肝组织毒性,应引起重视。三七总甙另一单体成分人参皂苷Rg1具有三七总甙的抗肝纤维化作用,在一些方面甚至超过三七总甙而无Rb1的毒性作用,故可以认为是较理想的防治肝纤维化的药物。
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