芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织GLUT1及TGFβ1表达的影响

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目的:探讨芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织GLUT1及TGFβ1表达的影响。方法:60只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(DN)、芡实小剂量组(EL组)、芡实中剂量组(EM组)、芡实大剂量组(EH组)及氯沙坦钾组(LP组)。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,45mg/kg)制作DN模型,造模成功后,给予EL组大鼠芡实1.5g/kg/d,EM组大鼠芡实3.0g/kg/d,EH组大鼠芡实6.0g/kg/d,LP组大鼠氯沙坦钾30mg/kg/d,N组及DN组给予等量蒸馏水,均采用灌胃给药。连续灌胃12周后检测大鼠血糖、肌酐、尿素氮、24小时尿蛋白定量;HE、Masson、PAS染色及电镜观察各组大鼠肾脏病理变化;免疫组化、western-blot法测定大鼠肾组织GLUT1和TGFβ1在表达情况。结果:1.生化指标结果:实验12周末,与正常组比较,血糖、BUN、Scr、24h尿蛋白定量显著升高(P<0.05);与DN组比较,芡实中、高剂量组大鼠病理改变减轻,BUN、Scr、24h尿蛋白定量显著下降(P<0.05);芡实中、高剂量组及氯沙坦钾组降尿蛋白作用无统计学差异。2.病理改变:与正常组比较,DN组大鼠可见肾小球肥大,系膜基质增生,基底膜增厚,芡实中、高剂量组及氯沙坦钾组大鼠上述病理改变较DN组减轻。3.肾组织GLUT1的表达:免疫组化结果显示,正常组大鼠GLUT1在肾小球系膜区和肾小管都有少量表达,DN组表达增强,以系膜区增强为主;与正常组比较,DN组GLUT1平均光密度值(IOD)显著升高(P<0.05),与DN组比较,芡实中、高剂量组及氯沙坦钾组GLUT1的IOD明显降低(P<0.05);western-blot结果显示,与正常组比较,DN组GLUT1表达明显增强(P<0.05),与DN组比较,芡实中、高剂量组及氯沙坦钾组GLUT1表达明显减弱(P<0.05);GLUT1在免疫组化、western-blot两种检测方法中表达一致。4.肾组织TGFβ1的表达:免疫组化结果显示,正常组大鼠TGFβ1在肾小球和肾小管上皮细胞都有少量表达,DN组表达增强,且以肾小管表达增强尤为显著;与正常组比较,DN组TGFβ1的IOD值显著升高(P<0.05),与DN组比较,芡实中、高剂量组及氯沙坦钾组TGFβ1的IOD值明显降低(P<0.05);western-blot结果显示,与正常组比较,DN组TGFβ1表达明显增强(P<0.05),与DN组比较,芡实中、高剂量组及氯沙坦钾组TGFβ1表达明显减弱(P<0.05);TGFβ1在免疫组化、western-blot两种检测方法中表达一致。结论:芡实可能通过下调GLUT1及TGFβ1在糖尿病肾病大鼠肾组织的表达,从而延缓糖尿病肾病的进展。
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