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目的:
①对阴虚动风证帕金森病LD毒副反应大鼠模型中医证候属性的进一步验证;②探讨阴虚动风证LD大鼠TH及GDNF的动态变化。
方法：
本课题在前期研究的基础之上,采用经典的6-羟基多巴胺单侧损毁注射法制作PD模型,进一步腹腔注射左旋多巴/苄丝肼(50mg/kg),每日2次,连续2周,制作帕金森病LD毒副反应模型。并从不同的时间点(2周、4周、6周),从动物行为学、酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor GDNF)蛋白角度,结合以方测证,应用不同中医治法方药(滋补肝肾法、活血化瘀法、化痰散结法及综合治法)进行比较研究,进一步验证前期研究制备的帕金森病大鼠药物毒副反应(以下简称LD大鼠)的中医证候属性;同时观察阴虚动风证TH及GDNF的动态改变,以期揭示该证的内在本质。
结果：
①行为学方面,LD大鼠对侧旋转圈数、AIM评分、旋转持续时间、剂峰旋转圈数均呈不断增加趋势、旋转启动时间呈不断减少的动态变化趋势;②结合以方测证,各中医治法组在不同时间点(2周、4周、6周)以AIM行为表现为主的症状、体征均有明显的改善,TH及GDNF的表达均明显增加,其中以滋补肝肾为主的滋肾平肝组和综合治法组的疗效为最佳;③TH及GDNF蛋白方面,阴虚动风证LD大鼠TH及GDNF呈不断减少的动态变化趋势,两者的变化趋势与LD大鼠AIM表现及黑质损伤的严重程度明显相关。
结论：
①LD毒副反应病证结合模型有很好的稳定性和可重复性,可以作为帕金森病中医药动物实验研究的基本工具,进行后续的实验研究;②结合以方测证,进一步证明我们研制的帕金森病左旋多巴毒副反应病证结合模型的基本中医证候属性为阴虚动风证;③阴虚动风证LD大鼠有明显TH和GDNF的微观病理改变,两者与该证存在明显的相关性,两者的联合检测将有助于阴虚动风证本质的探讨,且两者联合应用将是帕金森病缓解毒副反应治疗的重要研究方向。