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多梳家族蛋白(PolycombGroupprotein，PcG)率先在果蝇中发现，是进化上非常保守的调节因子，几乎在所有细胞中均有表达。其主要的功能为染色质水平上的转录抑制，在胚胎发育、细胞周期、肿瘤形成及干细胞自我更新方面均起到非常重要的作用。NSPc1(NervousSystemPolycomb1，又名PCGF1，Polycombgroupringfinger1)是于2001年发现的PcG家族基因，与哺乳动物PcG家族基因Bmi1、Mel18有较高同源性。先前的研究表明，NSPc1在哺乳动物细胞中是典型的核转录因子，通过表观遗传机制，调控细胞增殖及肿瘤发生等重要过程。
近年来，PcG蛋白在干细胞中的功能研究逐渐成为热点，由于NSPc1在小鼠发育早期神经系统高表达，所以我们想研究其在小鼠神经系统发育过程中的功能。本文首先建立了小鼠神经干细胞原代培养及增殖与分化鉴定技术：小鼠神经干细胞(mNSC)通过将胎龄为14.5—16.5天的胎鼠前脑皮层吹散分离获得。经过培养可使mNSC成功增殖形成神经球(Neurosphere)。将神经球打散并经过诱导分化，可使mNSC成功分化成星形胶质细胞、神经元及少突胶质细胞。通过电转mNSC能够成功实现基因的瞬时表达并且使细胞一直具有较高活性。进行克隆分析(NCFCassay)能够更精确地将神经干细胞的增殖能力反应出来。在此基础上，我们成功构建了过表达及敲低NSPc1的慢病毒载体，包装并浓缩纯化了病毒，使之滴度达到107TU/ml。
通过电转小鼠神经干细胞，我们发现过表达NSPc1的小鼠神经干细胞增殖能力有所提高，而将NSPc1瞬时敲低，神经干细胞的增殖能力则有显著降低。同时，敲低NSPc1之后，小鼠神经干细胞分化出更多的神经元，这与小鼠神经系统发育过程中，神经元的较晚出现同NSPc1表达量逐渐升高是相对应的。
以上工作以小鼠神经干细胞为模型，通过基因敲低及过表达两种方法研究NSPc1在干细胞增殖与分化方面的功能，取得了一些初步结果如维持正常增殖及抑制神经元分化等。同时摸索了小鼠神经干细胞培养、慢病毒包装与纯化技术，为今后深入研究分子机制奠定基础。