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目的：建立大鼠糖尿病牙周炎模型，观察补肾方剂对糖尿病大鼠牙周炎牙周组织形态结构及一氧化氮的影响，探讨补肾方剂减少NO生成、阻止牙周病变机制，为临床应用中药补肾方剂防治糖尿病牙周炎提供理论依据。
方法：选用健康雄性SD大鼠116只，3-4月龄，随机取82只大鼠腹腔注射STZ溶液(55mg/kg体重)，制备糖尿病模型。注射STZ溶液3天后，尾尖采血测定空腹血糖，用代谢笼收集12小时尿测定尿糖，确定糖尿病出现后一周，随机取61只糖尿病大鼠和17只正常大鼠，用直径为0.2mm的正畸钢丝结扎大鼠双侧上颌第一磨牙颈部。4周后进行牙周炎成模检测。16只未作任何处理的大鼠为正常组，16只单纯结扎的大鼠为牙周炎组，20只未做结扎的糖尿病大鼠为糖尿病组，60只糖尿病牙周炎大鼠随机分为糖尿病牙周炎组、糖尿病牙周炎AG治疗组和糖尿病牙周炎中药治疗组，各20只。共分为6组。结扎术后4周随机抽取动物做右上颌第一磨牙牙体牙周联合切片，光镜观察确定牙周炎形成。建立糖尿病牙周炎模型后第一天起，糖尿病牙周炎中药治疗组给以中药补肾方剂(90g水煎，浓缩至90ml，1.5ml2/日灌胃)，糖尿病牙周炎AG治疗组用稀释成3‰的氨基胍溶液灌养。其余各组自由饮水。于给药后4周、6周时处死动物并取上颌骨，左侧上颌骨取第一磨牙周围的龈组织，测定NO的含量，右侧上颌骨置于4％多聚甲醛溶液中固定。7％乙二胺四乙酸二钠(EDTA)中脱钙2月，制作HE染色组织学切片，做光镜及组织学计量观察；免疫组织化学染色，观察一氧化氮合酶(iNOS)在龈组织中的表达。
结果：1腹腔注射STZ后第3天，大鼠空腹血糖显著升高，尿糖阳性，说明腹腔注射STZ已成功建立糖尿病动物模型。2牙周结扎术后4周组织学观察：结扎动物结合上皮向根方增殖形成牙周袋，牙龈上皮和固有层内有轻度炎细胞浸润；牙周纤维排列紊乱；牙槽嵴顶破坏吸收。3用药期间组织学观察：正常组：整个实验过程结合上皮位置正常，牙周韧带纤维排列有序、整齐；牙槽嵴顶无吸收。糖尿病组：4周时牙龈上皮和固有层内有轻度炎细胞浸润；牙周膜毛细血管数目增多、充血；牙槽嵴顶无吸收。6周时固有层内可见中度炎细胞浸润；牙周纤维排列紊乱，牙槽嵴顶无吸收。牙周炎组：4周时结合上皮与牙体分离加深牙周袋，固有层中度炎细胞浸润；牙周膜纤维排列紊乱，牙槽嵴高度降低。6周时有较深牙周袋形成；牙槽嵴高度降低，可见活跃的破骨细胞。糖尿病牙周炎组：4周时，固有层中度炎细胞浸润；牙周膜纤维排列紊乱，牙槽嵴顶高度降低，可见大量的破骨细胞。6周时牙龈上皮糜烂，固有层内有重度炎细胞浸润，形成深牙周袋，牙周膜纤维断裂，牙槽嵴顶可见大量的破骨细胞，牙槽骨高度降低；牙骨质破坏吸收。糖尿病牙周炎AG治疗组：4周时固有层内有轻度炎细胞浸润；牙周膜纤维排列紊乱；牙槽嵴顶有新骨形成。6周时牙槽嵴顶成骨细胞较多，有新骨生成，牙槽嵴高度增加。糖尿病牙周炎中药治疗组：4周时，固有层内有轻度炎细胞浸润；牙周膜纤维新生；牙槽嵴顶有新骨形成。6牙槽嵴顶有新骨形成，牙槽骨高度增加，有新牙骨质形成。4用药期间组织学计量学观察：结缔组织附着水平丧失量：4周时结缔组织附着水平丧失量由高到低依次为：糖尿病牙周炎组、牙周炎组、糖尿病牙周炎AG治疗组、糖尿病牙周炎中药治疗组、糖尿病组与正常组，其中，正常组与糖尿病组比较无显著性差异(P＞0.05)，糖尿病牙周炎AG治疗组与糖尿病牙周炎中药治疗组比较无显著性差异(P＞0.05)，其余各组之间比较均有显著性差异(P＜0.05)。6周时结缔组织附着水平丧失量由高到低依次为：糖尿病牙周炎组、牙周炎组、糖尿病牙周炎AG治疗组、糖尿病牙周炎中药治疗组、糖尿病组与正常组，其中，正常组与糖尿病组比较无显著性差异(P＞0.05)，其余各组之间比较均有显著性差异(P＜0.05)。牙槽骨高度丧失量：4周时牙槽骨高度丧失量由高到低依次为：糖尿病牙周炎组、牙周炎组、糖尿病牙周炎AG治疗组、糖尿病牙周炎中药治疗组、糖尿病组与正常组，其中，正常组与糖尿病组比较无显著性差异(P＞0.05)，糖尿病牙周炎AG治疗组与糖尿病牙周炎中药治疗组比较无显著性差异(P＞0.05)，其余各组之间比较均有显著性差异(P＜0.05)。6周时牙槽骨高度丧失量由高到低依次为：糖尿病牙周炎组、牙周炎组、糖尿病牙周炎AG治疗组、糖尿病牙周炎中药治疗组、糖尿病组与正常组，其中，正常组与糖尿病组比较无显著性差异(P＞0.05)，其余各组之间比较均有显著性差异(P＜0.05)。5各组大鼠龈组织中NO含量的动态变化(给药后4、6周)给药后4周时，各组大鼠龈组织中NO含量由高到底依次为糖尿病牙周炎组、糖尿病组、牙周炎组、正常组、糖尿病牙周炎中药治疗组及糖尿病牙周炎AG治疗组。其中糖尿病牙周炎组与糖尿病组比较无显著性差异(P＞0.05)，正常组与糖尿病牙周炎中药治疗组比较无显著性差异(P＞0.05)，其它各组比较均有显著性差异(P＜0.05)。给药后6周时同给药后4周。6iNOS在各组大鼠牙龈组织中的表达正常组：弱阳性表达。牙周炎组：阳性表达。糖尿病组：阳性或强阳性表达。糖尿病牙周炎组：强阳性表达。糖尿病牙周炎AG治疗组：弱阳性表达。糖尿病牙周炎中药治疗组：呈弱阳性表达。
结论：1补肾方剂促进糖尿病牙周炎牙周组织的修复，降低NO的含量。随着NO含量降低，牙周组织更趋向修复。2糖尿病牙周炎中药治疗组龈组织中NO含量与正常龈组织中NO含量无差异，提示补肾方剂对NO的调节作用更接近生理状态。3AG也能促进牙周组织的修复，降低NO含量，但对牙周组织的修复不及补肾方剂。4AG降低NO的作用比补肾方剂更明显，用药6周后，糖尿病牙周炎中药治疗组的牙周组织的修复优于糖尿病牙周炎AG治疗组，提示：NO适量时，促进牙周组织的修复，NO含量低于或高于正常时对牙周组织的修复都是不利的。5补肾方剂的治疗作用优于AG，补肾方剂对糖尿病牙周炎的治疗作用可能为多途径，这有待于进一步探讨。