【摘 要】
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中脑三叉神经核(Mesenphalic Trigeminal Nucleus,MeV)在处理口面部的感觉传入信号上起着非常重要的作用。通过咬肌或牙周注射荧光染料DiI(双侧或单侧)可以同侧逆向标记到中脑三
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中脑三叉神经核(Mesenphalic Trigeminal Nucleus,MeV)在处理口面部的感觉传入信号上起着非常重要的作用。通过咬肌或牙周注射荧光染料DiI(双侧或单侧)可以同侧逆向标记到中脑三叉神经核核团胞体,确定该核团直接发出轴突对咬肌和牙周组织起着感觉功能。关于其如何进行感觉的机制还不清楚。本研究发现一种TRP通道即TRPA1通道在其中可能起着重要作用。TRPA1被报道在外周感觉神经元中起着非常重要的感知功能,但是在中枢的感觉神经元中的功能还是未知的。本研究第一次发现TRPA1在中枢的中脑三叉神经核感觉神经元是功能性表达的。当给与TRPA1的激动剂时,通过膜片钳可以检测到TRPA1的电流,并且通过胞内钙成像的技术可以检测到其激活后引起的胞内钙升高,这样的反应在TRPA1基因敲除小鼠中是不存在的。这暗示着TRPA1通道对MeV的感觉功能起着重要作用。关于MeV神经元怎样传递信号,其电学方面的特性已经被大量报道,但是关于其分泌的特性却鲜为人知。这里利用膜片钳尤其是膜电容的记录方法直接记录到了MeV胞体上明显的分泌信号。在这之前还没有人在脑片上直接利用电容信号实时记录到神经元的胞体分泌。当在零钙外液或者当胞内钙被BAPTA螯合后,该分泌信号就受到了显著性抑制,揭示了MeV胞体的分泌过程的钙依赖性。胞内灌入破伤风毒素的结果证实了MeV胞体的分泌依赖于SNARE蛋白复合物中的synaptobrevin蛋白。并且利用dynasore(dynamin的抑制剂)证实MeV的囊泡循环是依赖于dynamin。随后本研究中检测了其分泌过程是如何被调节的,发现第二信使cAMP和HCN通道都可以对它进行调节。本研究最重要的一点是,利用膜电容的技术实时检测到TRPA1被激活后直接引起的MeV的胞体分泌。这些结果证明MeV上存在着功能性表达的TRPA1,并且其激活可以直接激活MeV神经元的囊泡释放,这些发现为揭示MeV核团对口面部感觉功能的机制给了很强的指引。 结论:MeV神经元胞体存在囊泡释放;TRPA1存在于MeV神经元;TRPA1激活可引起细胞分泌。
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