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目的
腺病毒(Adenovirus，AdV)是引起人类呼吸道和消化道感染的重要病原之一，严重威胁着人类的健康。腺病毒感染主要是以3、5、7型为主，主要引起小儿肺炎，所以建立有效的防治腺病毒感染措施意义重大。六邻体是腺病毒主要的结构蛋白，能够刺激机体产生相应中和抗体。本实验旨在预测不同型别腺病毒六邻体所共有的型间共同的特异性抗原表位，克隆、表达高度保守的腺病毒六邻体蛋白片段，为研发多效价的腺病毒疫苗奠定基础。
方法
利用计算机软件对6组16个血清型HAdV六邻体蛋白氨基酸序列同源性比较分析，结合抗原性预测的结果和六邻体蛋白三维空间结构暴露情况，确定了不同型别腺病毒六邻体所共有的型间共同的特异性抗原表位，选择了人3型腺病毒六邻体蛋白P2区基因的片段进行克隆、表达。以HAdV3基因组DNA为模板，PCR扩增目的片段，定向克隆构建原核表达质粒pQE31-P2，经鉴定后转化E. coli M15，IPTG诱导表达，用Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱纯化重组蛋白。
结果
扩增的P2基因长度为1140bp，构建的重组质粒pQE31-P2，在E. coli M15中获得高效表达。SDS-PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约47×10<3>，经Ni-NTA琼脂糖亲和层析后，目的蛋白纯化效果理想。
结论
获得了纯化的HAdV3重组P2区六邻体蛋白。该蛋白的高效表达和纯化，为开发研制预防多型别HAdV感染的多价腺病毒基因工程疫苗奠定了基础。