白藜芦醇的酵母菌发酵生产及减肥机制研究

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白藜芦醇存在于多种植物中,其中中药虎杖和葡萄中的含量尤为丰富,是一种天然的小分子多酚类化合物。现有白藜芦醇的提纯合成法主要是天然植物提取法和化学合成法,都由相对局限性,因此本论文对首株重组酵母菌产白藜芦醇的发酵条件进行讨论,旨在为开发微生物发酵生产白藜芦醇的新方法打下理论基础,同时对白藜芦醇的减肥效果和机理做了初步研究。 首先对可用于发酵生产白藜芦醇的Saccharomyces.cerevisiae FY23重组菌株的发酵条件进行了研究。本章先建立HPLC检测白藜芦醇的方法,接着检测菌株FY23在原培养条件下白藜芦醇的产量,最后研究了一些重要因素对发酵的影响,以期得到生产白藜芦醇的较优条件。结果表明:培养基选用YPD培养基,其中碳源选用1.4%的葡萄糖、氮源利用蛋白胨。当种龄为36h,接种量为6%,培养基的初始pH值为5.0,培养温度为30℃,摇床速度为200rpm/min,整个发酵过程的时间为72h时,获得白藜芦醇的产量最高,可达1.913ug/L。 接着讨论白藜芦醇的减肥效果。首先采用高脂饲料建立肥胖小鼠模型,同时,通过给水口服方式用白藜芦醇对饮食诱导的肥胖鼠进行干预。经过18周喂养后,对给药组与高脂肪对照组进行体重、脂肪含量、血清总胆固醇和低密度脂蛋白、全视野内脂肪数目等指标的比较,观察白藜芦醇的减肥作用。结果发现:白藜芦醇可使肥胖小鼠的体重减轻约5克左右,脂肪含量减少5克左右,全视野内脂肪小型细胞数目增加、脂肪细胞直径变小;降低肥胖小鼠血清血清总胆固醇和低密度脂蛋白水平,与此同时发现白藜芦醇干预后的小鼠对胰岛素敏感性增强。因此证明白藜芦醇对高脂食物诱导肥胖有一定的抑制作用。 最后部分讨论白藜芦醇减肥可能的机制。在能量摄入和能量消耗两方面进行了减肥效果的讨论。首先排除减肥作用是由于抑制食欲而引发的可能性;进一步通过检测体温的变化,发现给药后的小鼠产热增加,即证明白藜芦醇的减肥作用是在不影响能量摄入的同时通过增加能量消耗而达到的;继而通过检测脂肪组织中产能细胞器线粒体面积的增加、生热相关蛋白表达的增多进一步讨论了白藜芦醇减肥作用
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