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目的： 1.通过观察内向整流钾通道（inward rectifier potassium channels, Kir）阻滞剂氯化钡（BaCl2,0.1-1.0 mmol/L）对离体大鼠冠状动脉（Rat coronary artery, RCA）静息张力的影响，研究Kir阻滞对RCA的收缩作用。 2.采用去钙-复钙的方法，研究BaCl2收缩RCA对细胞内钙（[Ca2+]i）释放和细胞外钙（[Ca2+]o）内流的依赖性。 3.通过观察氯通道阻滞剂NPPB和尼氟灭酸（NFA），钙通道阻滞剂硝苯地平对BaCl2收缩RCA作用的影响，从氯通道和钙通道角度探讨其收缩机制；通过抑制剂（环氧合酶抑制剂吲哚美辛、MAPK抑制剂PD98059和SB239063）实验，探讨BaCl2收缩RCA与前列腺素合成及MAPK通路之间的关系。 方法： 1.正常成年雄性Sprague-Dawley大鼠，200-250 g，腹腔注射戊巴比妥钠（40 mg/kg）麻醉，断头，放血处死，迅速取出心脏，置于4℃预冷生理盐溶液（physiological salt solution, PSS）中。在解剖显微镜下沿右心室打开心腔，钝性分离冠状动脉（直径150~260μm）。将血管剪成长度约为2 mm的血管环，使用两根直径为40μm的钢丝固定于Multi Myograph System-610M微血管张力记录仪（DMT）浴槽（盛有5mL PSS，37℃）中。采用PowerLab张力记录系统观察RCA血管张力变化。血管环标准化并平衡1 h后，采用KCl（60 mmol/L）刺激血管环三次，待血管环对KCl（60 mmol/L）的收缩可重复后开始正式实验。静息状态时，向浴槽中累积加入BaCl2（0.1,0.3,1.0 mmol/L），记录血管张力变化，结果以KCl（60 mmol/L）引起的最大收缩幅度为100％，计算BaCl2各浓度所致收缩幅度的百分比，并构建BaCl2浓度-效应曲线。 2.采用去钙-复钙的方法，观察细胞外钙（[Ca2+]o）内流和细胞内钙（[Ca2+]i）释放在BaCl2收缩RCA中的作用。当RCA对BaCl2（0.3 mmol/L）的收缩幅度可重复时，先用含有EGTA（1.0 mmol/L）的无钙PSS液洗脱血管环三次，再用不含有EGTA的无钙PSS液洗脱三次，稳定20 min后，向浴槽内加入BaCl2使其在浴槽内的终浓度为0.3 mmol/L，观察RCA血管张力的变化。10 min后，向浴槽中加入CaCl2（2.5 mmol/L），观察复钙后RCA血管张力的变化。计算复钙前后BaCl2所致收缩占总收缩的百分比，以此反映BaCl2引起的RCA收缩对细胞内外钙的依赖性，以KCl（60 mmol/L）为比较对照。 3.待RCA对BaCl2（0.1-1.0 mmol/L）反应可重复后，分别观察以下抑制剂对BaCl2收缩RCA的影响:L-型电压依赖性钙通道阻滞剂硝苯地平（0.3μmol/L）、ERK1/2抑制剂PD98059（3μmol/L）、p38MAPK抑制剂SB239063（3μmol/L）、环氧合酶抑制剂吲哚美辛（10,30,100μmol/L）、氯通道阻滞剂NFA（10,30,100μmol/L）和NPPB（10,30,100μmol/L）。用不同浓度抑制剂分别预孵30 min后，在抑制剂持续存在的情况下，用同浓度的BaCl2刺激RCA。结果以KCl（60 mmol/L）引起的收缩幅度为100%，分别计算预孵不同浓度抑制剂前后BaCl2的收缩幅度。 结果： 1.静息状态下，BaCl2（0.1-1.0 mmol/L）浓度依赖性地引起RCA收缩。BaCl2（0.1,0.3,1.0 mmol/L）的收缩幅度分别为（0.42±0.12）mN、（2.63±0.51）mN、（5.68±1.62） mN，分别相当于KCl（60 mmol/L）收缩幅度的（7.64±2.13）%、（49.32±6.46）%、（104.56±10.15）%。其EC50值为0.34mmol/L。 2. BaCl2（0.3 mmol/L）在正常PSS液中的收缩幅度为（2.83±0.98）mN，相当于KCl（60 mmol/L）收缩幅度的（49.92±5.83）%。在无钙液中和复钙后的幅度分别占BaCl2总收缩幅度的（31.63±5.23）%、（68.37±5.94）%。KCl（60 mmol/L）在正常PSS液中的收缩幅度为（5.78±1.21）mN，在无钙液中和复钙后的收缩百分比分别为KCl总收缩的（5.58±1.63）%、（94.42±11.27）%。 3.硝苯地平（0.3μmol/L）对BaCl2最大收缩的抑制率为（87.82±5.43）%（P<0.01）。NFA（10,30,100μmol/L）、NPPB（10,30,100μmol/L）浓度依赖性地使BaCl2浓度-效应曲线右移，并抑制最大反应。NFA（30,100μmol/L）对BaCl2最大收缩的抑制率分别为（28.29±5.37）%（P<0.05）、（82.24±7.69）%（P<0.01），IC50为56.34μmol/L。NPPB（30,100μmol/L）使BaCl2对RCA的最大收缩幅度分别减小了（40.45±6.91）%（P<0.05），（90.83±10.42）%（P<0.01），IC50为37.81μmol/L。 4.吲哚美辛（10,30,100μmol/L）浓度依赖性地使BaCl2浓度-效应曲线右移，并使其最大效应降低。Indo（100μmol/L）对BaCl2最大收缩的抑制率为（73.23±5.47）%（P<0.01），IC50为93.42μmol/L。 5.预孵PD98059（3μmol/L）对BaCl2最大收缩的抑制率为（40.62±5.29）%（P<0.05）；预孵SB239063（3μmol/L）对BaCl2最大收缩的抑制率为（54.95±8.32）%（P<0.05）。 结论： 1.静息状态下，BaCl2（0.1-1.0 mmol/L）浓度依赖性地收缩离体RCA。 2. BaCl2收缩RCA所需要的Ca2+大部分来源于细胞外钙内流，小部分来源于细胞内钙释放。 3. BaCl2收缩RCA的机制可能与具有缩血管作用的前列腺素类物质（PGs）合成增加、氯通道和L-型电压依赖性钙通道活性增加以及MAPK信号通路激活有关。