论文部分内容阅读
背景和目的: LMO4是LMO蛋白家族的成员之一，结构与LMO2具有高度的同源性，都具有2个串联的LIM结构域。已知LMO2对造血和红细胞分化成熟过程至关重要，LMO2和LMO4都能与共同的转录因子Lim结构域结合蛋白1（Lim domain binding protein1,LDB1）组成蛋白复合体共同调控调控造血，例如调控T细胞急性白血病，以及斑马鱼后期造血细胞发生，提示LMO4可能存在类似LMO2蛋白的功能，参与造血细胞的发生、发育和分化。急性早幼粒白血病（acute promyelocytic leukemia，APL），是急性髓系白血病（acute myelocytic leukemia，AML）的亚型之一，主要症状就是在血液中和骨髓中早幼粒细胞的非正常积累，血纤维蛋白原缺乏和弥散性血管内凝血的出现。特异性的染色体异位（t15:17）形成PML-RARα融合蛋白，是APL的主要病因。NB4细胞是早期从APL患者分离出来的永生化的细胞系，常常作为研究造血细胞分化和增殖的细胞模型。因此本文主要探讨LMO4对急性早幼粒白血病细胞（NB4）增殖和分化的影响，试图说明LMO4是否参与APL的发病过程及其对临床治疗APL的影响。 方法: 利用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)和Western blot(WB)检测急性早幼粒白血病细胞系（NB4）中的LMO4表达；利用慢病毒介导lmo4的cDNA感染NB4细胞后，建立过量表达LMO4的NB4细胞株；采用MTT方法检测细胞增殖；使用全反式维甲酸（All trans retinoic acid,ATRA）诱导NB4细胞分化0～48h，瑞氏染色观察分化的细胞特性；同时使用流式细胞分析技术分析NB4细胞分化后产生CD11b阳性的细胞比例。 结果: qRT-PCR和WB结果均提示急性早幼粒白血病细胞中LMO4表达增加；ATRA诱导NB4分化时，LMO4的表达降低；MTT结果证实过量表达LMO4促进NB4增殖；瑞氏染色和流式细胞分析等结果均显示：过量表达LMO4能够促进ATRA诱导NB4细胞分化。 结论: LMO4参与调节NB4细胞的增殖，并能增加NB4细胞对ATRA的敏感性，促进其分化。