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本研究针对紫花苜蓿(MedicagosativaL.,下简称苜蓿)自毒性问题,根据国内外研究现状,从苜蓿自毒性作用效应、自毒性作用阈值、苜蓿品种间自毒性强度差异、自毒性物质成分研究和自毒性成分化感作用等5方面进行试验研究,以期为解决苜蓿自毒性问题提供理论依据和技术支持。研究得出如下结论:
1苜蓿自毒性效应及其作用阈值。生物测定法可较好地检验自毒性现象,其试验重现性好。当添加苜蓿叶浸提物浓度为0.2g·L-1时可显著促进苜蓿萌发速率(P<0.05),对发芽率和胚根生长无显著影响;添加0.3~4.0g·L-1时,对萌发速率和发芽率影响较小,但抑制胚根生长(P<0.05),相关性分析显示,胚根长度与处理浓度呈现高度负相关(r=-0.77912);处理浓度8.0g·L-1时,发芽势、发芽率和胚根长均受到显著抑制(P<0.05)。处理浓度0.1g·L-1、2.0g·L-1、4.0g·L-1时,促进下胚轴生长(P<0.05),但是下胚轴长度与处理无显著相关性(r=0.10606)。
2不同苜蓿品种自毒性强度分布。生物测定结果表明,50个品种可分为3大类9个小组。自毒性最弱的组只有一个品种,为key;最强的组有GS20001X、超级阿波罗、射手、NS00-32、牧野、WL232HQ共5个;其余品种分布在上述两组之间。盆栽条件下苜蓿叶粉处理对受体苜蓿萌发、株高、鲜干重均有显著影响(P<0.05)。12个苜蓿品种叶粉末表现出自毒性差异。KEY和FGC601叶粉末对受体植株生长影响小,多项指标显著地低于其他处理(P<0.05);其他品种均对vector表现出较强抑制作用,但彼此间差异不显著。
3自毒性物质成分分析及外源添加试验。与对照相比,肉桂酸类物质对受体苜蓿种子萌发和幼苗生长都有明显影响(P<0.05)。香豆素对vector幼苗的抑制作用最强。邻香豆酸、间香豆酸和对香豆酸对vector幼苗影响相对较小,仅对胚根生长有一定影响。反式肉桂酸具有促进幼苗下胚轴伸长的作用。高效液相色谱检测结果显示,苜蓿叶浸提物中发现6种目标物质中的4种,未检测到反式肉桂酸和氢化肉桂酸。
4苜蓿自毒性物质的化感作用研究。在生物测定和盆栽试验中,苜蓿叶所含的化感物质对九种受体植物均产生影响。受体植物的根部生长受到的抑制作用最强,与对照的差异达到显著水平(P<0.05);受体植物萌发、株高、鲜干重所受影响较小。在本试验条件下,苜蓿叶浸提物可提高高羊茅(FestucaarundinaceaSchreb.)的发芽势和发芽率(P<0.05),相关机理有待进一步研究。