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目的:严重烧伤后将导致全身炎症反应和微血管通透性升高,引起组织水肿和血容量的丢失,继而造成烧伤休克和补液量增加、甚至发展成多器官功能障碍综合征(MODS)。血必净是临床用于治疗脓毒症和MODS的中药注射液,具有对抗炎症和保护血管内皮细胞的作用。本研究的目的是探讨血必净注射液能否通过降低脏器微血管通透性和组织水肿,改善烧伤休克犬血流动力学紊乱,减少早期补液量,旨在为临床治疗烧伤休克提供实验依据。方法:1动物模型16-20月龄成年雄性beagle犬24只,体重为10-14 kg,购入后适应性饲养1周。术前禁食12 h,氯胺酮+速眠新Ⅱ(3:1)复合麻醉剂(0.2 ml/kg)肌注麻醉。采用电动剃毛刀剃除颈、背、臀及腹部毛发、并用棉垫包裹动物以保持体温。无菌操作下分别从颈外静脉置入静脉导管,颈总动脉置入PICCO的压力/温度感应导管,连接PICCO心肺容量监护仪进行监测,待血流动力学指标稳定后将导管自颈后皮下隧道穿出并固定,使用含1‰肝素钠帽封管。碘伏消毒会阴部后置入尿管,连接尿袋并固定。采用1%丙泊酚(1-2 ml/kg)造成短暂全身麻醉后,将凝固汽油均匀涂抹于准备烧伤区域,点燃凝固汽油,腹部烧伤10 s,背部烧伤30 s,制作50%TBSAⅢ度烧伤比格犬动物模型。通过病理观察证实动物的烧伤程度。烧伤后8 h内静脉输入1%丙泊酚(1-2 ml/kg/h)维持全身麻醉,8 h后停止输入丙泊酚并将动物放回观察笼。2分组及处理24只比格犬随机分为手术对照组(OC组)、烧伤+乳酸林格液组(LR组)和烧伤+乳酸林格液含血必净组(LR/XBJ组),每组8只。手术对照组仅动静脉置管,输入生理维持量的乳酸林格液;烧伤+乳酸林格液组于烧伤后立即按照parkland公式进行补液;烧伤+乳酸林格含血必净液组于烧伤后静脉输入血必净注射液(4 ml/kg,0 h和4 h各输入1/2,10 min输完)后继续按照parkland公式输入乳酸林格液。补液过程中,始终调节每小时输液量以维持动物每小时尿量约1-2ml/kg。当每小时尿量<1 ml/kg/h时,增加补液量;当每小时尿量>2ml/kg/h时,减少补液量。3指标检测与方法设定0 h、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h、24 h为观测点,采用PICCO监测仪测定平均动脉压(MAP)、心排指数(CI)、肺血管通透性指数(PVPI)及血管外肺水指数(ELWI)。各观测点经静脉注射吲哚菁绿12.5 mg后1 min、2 min和3 min分别抽取2 ml静脉血,检测血浆容量变化。调节每小时输液量以维持尿量为1-2 ml/kg/h,记录累计尿量和计算累计净输入量。各时间点抽取静脉血检测红细胞压积。伤后24 h静脉注射荧光标记物葡聚糖2.5 mg,30 min后处死动物取各脏器组织、检测微血管通透性,并采用干湿重法检测各脏器含水率。制作组织切片,采用HE染色后、在高倍镜下观察中性粒细胞浸润数目。采用试剂盒检测中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和髓过氧化物酶(MPO)活性变化。结果:1血流动力学变化:与OC组比较,LR/XBJ组和LR组烧伤后MAP和CI显著降低,两组烧伤动物MAP和CI在1h降至最低值,之后逐渐升高,至24 h时恢复至接近正常水平,两组之间无显著差异(P>0.05);伤后两组PVPI和ELWI显著增高,在补液2 h后逐渐回落,两组间比较,LR/XBJ组ELWI和PVPI在1 h、2 h和4 h时显著低于LR组(均P<0.05)。2血容量:与OC组比较,LR/XBJ组和LR组烧伤后血容量均显著降低,在2 h后开始恢复,24 h接近正常水平;两组间比较,LR/XBJ组在4、6、8和24 h显著高于LR组(均P<0.05)。3红细胞压积:LR/XBJ组和LR组红细胞压积伤后比OC组均显著增加,伤后2 h开始下降,至24 h恢复至正常水平,但LR/XBJ组伤后2 h和4 h时均显著低于LR组(均P<0.05)。4各脏器微血管通透性:LR/XBJ组和LR组烧伤后各脏器微血管通透性比OC组均显著升高,但LR/XBJ组脏器微血管通透性低于LR组,肺和肠的通透性显示差异有统计学意义(均P<0.05)。5各脏器含水率:LR/XBJ组和LR组烧伤后各脏器含水率比OC组均显著升高,LR/XBJ组各脏器含水率均低于LR组,其中肺和肠的含水率差异显著(均P<0.05)。6每小时尿量和累计尿量:根据尿袋读数读出累计尿量,每小时尿量=本小时累计尿量-前一小时累计尿量。LR/XBJ组和LR组每小时尿量均能维持1-2 ml/kg,两组间比较,无明显差异(P>0.05)。7累计净输入量:根据每小时尿量,调节输液量。累计净输入量=累计总输入量-累计尿量。烧伤后LR/XBJ组在4 h后至24 h累计净输入量均显著低于LR组,差异有统计学意义。8中性粒细胞计数:与OC组比较,LR/XBJ组和LR组烧伤后脏器组织中性粒细胞计数明显增加。LR/XBJ组中性粒细胞计数低于LR组,其中肺、肾及小肠中性粒细胞计数差异具有统计学意义(均P<0.05)。9弹性蛋白酶(NE):与OC组比较,LR/XBJ组和LR组烧伤后脏器组织中性粒细胞弹性蛋白酶活性明显升高。LR/XBJ组中性粒细胞弹性蛋白酶活性低于LR组,其中心、肺和小肠弹性蛋白酶差异具有统计学意义(均P<0.05)。10髓过氧化物酶(MPO):与OC组比较,LR/XBJ组和LR组烧伤后脏器组织髓过氧化物酶活性明显升高。LR/XBJ组髓过氧化物酶活性低于LR组,其中肺和小肠差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:血必净注射液能够降低脏器微血管通透性和组织水肿,改善烧伤休克犬血流动力学紊乱和脏器功能指标,减少严重烧伤早期补液量,上述作用的机制可能部分与其抑制脏器组织中性粒细胞聚集及弹性蛋白酶的活性有关。