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荞麦(Fagopyrum esculemum Moench)是一种适于在冷凉气候下生长的短季蓼科(polygonacoae)作物。植物分类学主要有苦荞(Fagopyrum tataricum Gaert)和甜荞(Fagopyrum esculentum Moench)两个品种。荞麦富含高生物价的蛋白质、维生素、矿物质元素、黄酮类化合物等,具有多种生物功能,如降血糖、降血脂、抗癌、抗氧化及清除自由基等。研究发现,荞麦种子中含有少量D-手性肌醇单体及大量的D-手性肌醇衍生物-荞麦糖醇(Fagopyritol),能有效地调节血糖,改善糖尿病人(特别是Ⅱ型糖尿病人)症状。D-手性肌醇(D-chiro-inositol,DCI)是肌醇立体异构体,它作为新一代胰岛素受体促敏剂,能有效地促进胰岛素功能,降低血糖、血甘油三酯水平等。进一步研究发现:D-手性肌醇在唯一的降血糖激素-胰岛素的信号传导过程中发挥极为重要的作用,当体内缺乏足够的D-手性肌醇时,会导致胰岛素抵抗现象。因此,补充D-手性肌醇可提高机体组织对胰岛素的敏感性,消除胰岛素抵抗,从根本上调节机体的生理机能和代谢平衡,从而降低糖尿病的发生率。本研究首先采用三种不同的提取方法对荞麦中D-手性肌醇粗提工艺进行研究,包括不同溶剂提取法、微波法、超声波法。通过对不同提取方法的工艺条件进行研究,分别确定出最佳的工艺条件。实验结果表明,采用不同溶剂提取荞麦中D-手性肌醇时,乙醇作为溶剂提取效果最好,乙醇提取的最佳工艺条件:温度30℃,乙醇浓度50%,料液比1:20,时间1.5h,进行二级提取荞麦中D-手性肌醇的含量达到4.95mg/g;采用微波法提取荞麦中D-手性肌醇,经单因素及正交试验确定最佳工艺条件:微波功率245W,微波加热时间120s,乙醇浓度80%,料液比1:30,此时D-手性肌醇的含量达到5.11mg/g;采用超声波法时,确定最佳工艺条件:乙醇浓度50%,料液比1:15,提取时间30min,浸提温度50℃,此时D-手性肌醇的含量为5.19mg/g。通过比较三种不同的提取方法对D-手性肌醇提取效果影响,确定采用超声波法提取时,荞麦中D-手性肌醇提取效果最好。在荞麦中D-手性肌醇粗提工艺基础上,为进一步提高荞麦提取物中D-手性肌醇的含量,去除提取物中可溶性碳水化合物及其它杂质。本研究采用两种不同方法作用于荞麦提取物进行研究。方法一采用不同种类微生物发酵荞麦提取物,增加荞麦籽粒水溶液中D-手性肌醇及其衍生物的含量,同时减少提取物中总糖含量,本研究采用酿酒酵母、毛霉、大肠杆菌、蜜蜂生球拟酵母、米曲霉、枯草芽孢杆菌、解酯假丝酵母、黑曲霉接种于荞麦提取物中进行培养,并跟踪测定提取物中各种成分的含量变化。结果表明,采用米曲霉培养5天后,荞麦提取液中D-手性肌醇含量达到6.07mg/g,且总糖含量降低较大,减少约53%,综合考虑为最符合条件的提取组分。采用活性炭柱层析纯化样品,D-手性肌醇及糖醇类物质可吸附于活性炭柱,然后进行梯度洗脱,经高效液相色谱法测定D-手性肌醇的纯度达到31.8%。此方法既简化D-手性肌醇纯化工艺,又可减少纯化过程中有机溶剂的使用量,降低生产成本。方法二利用萌芽及酸水解方法提高荞麦中D-手性肌醇含量,荞麦中D-手性肌醇大部分以衍生物的形式存在。荞麦籽粒经萌芽后,D-手性肌醇单体含量明显增加,提高约8倍。因此,本研究采用萌芽后荞麦籽粒作为后续试验材料。酸水解使荞麦中D-手性肌醇衍生物-荞麦糖醇转化为D-手性肌醇,明显提高荞麦中D-手性肌醇的含量。同时大部分碳水化合物转化为不溶性副产物,有利于简化D-手性肌醇的纯化过程。实验结果表明,荞麦中D-手性肌醇最佳提取工艺为:HCl浓度为9N,温度为95℃,时间为18h,料液比为1:10。在此条件下,提取物中D-手性肌醇含量达到62.5mg/g,达到未萌芽、水解前提取含量的15倍左右。D-手性肌醇提取物纯化过程,用等体积水溶解,加入2倍体积95%乙醇,70℃搅拌1h,充分反应后,取出冷却至15℃,得到D-手性肌醇沉淀固体。所得沉淀物,D-手性肌醇纯度较低,可用适量的水溶解,加入乙醇溶液,通过反复的加热和冷却处理,进行重结晶。经多次的重结晶处理,D-手性肌醇的含量达到432.92mg/g。