盐地碱蓬SsAPX、SsCAT1和SsCAT2基因的克隆及盐胁迫下的表达分析

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盐地碱蓬是一种叶肉质化的真盐生植物,在进化中可能形成了特殊的耐盐机制。大量的研究表明,植物耐盐性通常与较为有效的抗氧化系统呈正相关,盐生植物和甜土植物在活性氧解毒机制上可能存在显著的差异。因此,从盐生植物盐地碱蓬中克隆活性氧清除酶类基因并分析其功能,可能有助于理解植物中盐胁迫的耐受机制。 抗坏血酸过氧化物酶和过氧化氢酶是清除H2O2的重要酶类。本实验从400mmol/LNaCl处理的盐地碱蓬地上部分构建的λZap-cDNA文库中克隆了编码抗坏血酸过氧化物酶的基因SsAPX,编码过氧化氢酶的两个基因SsCAT1和SsCAT2,并分别对其序列特征、基因组结构和在盐胁迫下的表达特性做了详细的分析。结果表明:SsAPX编码盐地碱蓬细胞质抗坏血酸过氧化物酶,它在盐地碱蓬基因组中只有一个拷贝;不同盐处理(400mmol/LNaCl)时间下,SsAPX基因在盐地碱蓬叶中的表达量增加;同时抗坏血酸过氧化物酶的酶活在盐胁迫下也显著的增加。SsCAT1和SsCAT2编码盐地碱蓬过氧化物酶体过氧化氢酶。SsCAT1在盐地碱蓬基因组中至少有两个拷贝,而SsCAT2则只有一个拷贝。Northern杂交结果表明在盐胁迫条件下SsCAT1和SsCAT2的表达存在差异:400mmol/LNaCl处理48小时的盐地碱蓬根中的SsCAT1和SsCAT2 mRNA水平比对照显著提高,但是在叶中仅SsCAT1受盐诱导表达。不同盐处理时间下的表达分析也证实,在盐地碱蓬叶中仅SsCATl受盐诱导表达。同时,生理分析表明过氧化氢酶的活性在盐胁迫条件下显著提高。通过上述结果推测,SsAPX、SsCAT1和SsCAT2可能在保护盐地碱蓬免受氧化损伤的过程中起到一定作用。
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