【摘 要】
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比较同一物种不同生长发育阶段的差异表达基因，对调控生物各阶段的生长发育及代谢途径具有重大的理论和实践意义。糙皮侧耳的双核菌丝到原基的形成是一个复杂的发育过程，迄今为
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比较同一物种不同生长发育阶段的差异表达基因，对调控生物各阶段的生长发育及代谢途径具有重大的理论和实践意义。糙皮侧耳的双核菌丝到原基的形成是一个复杂的发育过程，迄今为止，对其分子机理的研究还鲜有报道。因此本论文采用抑制性消减杂交(SSH)技术构建糙皮侧耳双核菌丝期菌丝和原基期子实体的SSH cDNA文库，筛选差异表达的基因，期望在分子水平阐明糙皮侧耳发育机理。 本论文以糙皮侧耳新831为材料，原基期子实体为实验组(Tester)、双核菌丝期菌丝为对照组(Driver)和双核菌丝期菌丝为实验组(Tester)、原基期子实体为对照组(Driver)，采用抑制性消减杂交(SSH)技术构建糙皮侧耳两个时期的SSH cDNA文库，得到两个各含2000个克隆的正反向消减文库。从正反向文库中各挑取10个克隆进行测序，验证文库构建质量。本研究取得的主要结果如下: (1)利用SMARTerTM PCR cDNA Synthesis Kit合成双核菌丝及原基高质量的双链cDNA，为下步构建SSH cDNA文库奠定良好的基础。 (2)应用SSH技术成功构建了双核菌丝期和原基期的cDNA文库，克隆转化后通过菌液PCR扩增，选择cDNA插入片段在250-750bp之间的克隆，正反向文库中各得到2000个克隆。 (3)为验证文库构建效果，从两个文库中随机挑取20个克隆进行测序。发现一些参与调控合成原基的发育基因，表明构建的文库良好。
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