【摘 要】
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抗菌肽是自然界中的广泛存在的生物体先天免疫效应因子，因其具有广谱抗菌、杀菌力强、非特异性杀菌、不易使病原体产生抗性等特点而倍受科学家的关注。本研究主要从事抗菌肽基
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抗菌肽是自然界中的广泛存在的生物体先天免疫效应因子，因其具有广谱抗菌、杀菌力强、非特异性杀菌、不易使病原体产生抗性等特点而倍受科学家的关注。本研究主要从事抗菌肽基因的合成与植物表达载体的构建，为将来应用于甘蔗遗传转化做准备。本论文主要的内容有： 1) 设计引物利用PCR技术扩增得到抗菌肽基因片段并将其克隆进载体，测序结果表明PCR扩增得到的产物因存在缺失、倒置、突变、插入等现象而不能在下一步的实验中加以利用； 2) 将适合单子叶植物遗传转化的Ubi启动子连接入克隆载体pUC19并两端测序，证实本室保存的Ubi启动子与GENBANK上发布的序列具有很高的同源性，可以用于植物表达载体构建； 3) 用甘蔗偏爱的密码子设计了分泌型抗菌肽基因MSI-99并在其后设计了Nos终止子，在全基因合成得到该基因后在其前面连接上Ubi启动子，将Ubi—MSI-Nos连接到质粒pCAMBI2301的多克隆位点上构建得到植物表达载体； 4) 进行了甘蔗愈伤组织对甘露糖抗性筛选实验，发现培养基中仅含甘露糖而且浓度为30g／L的条件下愈伤组织仍然有少量增长，建议增加甘露糖的浓度直至愈伤组织不能继续生长，以得到最佳筛选浓度。
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