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目的：由于提取分离纯化的方法不同得到的多糖的性质可能不同，不同分子量的多糖可能具有不同的药理活性。虽然当归多糖(angelicapolysaccharides,APS)的研究已有报道，但本课题选用传统中药中国当归(AngelicasinensisDiels)，在传统提取方法的基础上进行了改进，并对工艺进行优化，确定最佳的提取、分离纯化工艺，得到一种中性APS；对该成分进行了含量、理化性质和红外分析，并研究APS对小鼠外周血白血细胞(Whitebloodcell,WBC)、淋巴细胞(1ymphocyte,LC)数量的影响，为进一步研究APS对小鼠造血干／祖细胞(hematopoieticstemprogenitor,HSPC)的动员作用提供理论指导和实验依据。
方法：本研究在传统提取方法的基础上进行改进，直接用蒸馏水提取，以所得中性APS的质量为指标，按L9(34)进行正交试验，对提取工艺进行优化；采用乙醇(Ethanol，EtOH)沉淀APS，饱和氢氧化钙(Calciumhydroxide，Ca(OH)2)除蛋白，经强酸性阳离子交换树脂(StrongacidiccationexchangeResin，SACER)和强碱性阴离子交换树脂(Strongbasicanionexchangeresin，SBAER)进一步分离纯化，最后透析纯化，以所得中性APS的纯度为指标，对这些分离、纯化条件进行优化；采用改良H2S04-苯酚法测定APS的含量，对测定条件进行优化；用自动旋光仪测定旋光度；在200～400nm进行紫外扫描检测AP$是否含有蛋白质、多肽及核酸；在红外分光光度计400～4000cm-1中红外区进行扫描，测定透光率曲线；采用外周血WBC、LC计数法，研究APS对小鼠外周血WBC、LC数的影响。
结果：研究结果表明最佳提取条件为：用10倍量的蒸馏水(即每100g的当归用1000ml的蒸馏水)提取，每次提取2h，共提取3次；最佳的分离纯化条件是：浓缩液醇沉后；用饱和Ca(OH)2除杂质时加入饱和Ca(OH)2至溶液的pHlO；SACER进行分离纯化时溶液的pH值应调节至3～4，SBAER进行分离纯化时溶液的pH值应调节至10～11；透析袋透析时间为3天；采用硫酸．苯酚法测定含量，测定波长为490nm，浓H2S04的用量为6ml，5％苯酚的用量为lml，显色时间为30min，测定结果表明APS的含量为：92．80％；旋光度测定APS的比旋度[Qr。=-30，表明APS的糖苷键为p构型；紫外光谱(Ultravioletspectrum，UV)显示表明AP$在206nm处有最大吸收峰，表明被测物为多糖，280、260nm处无吸收，说明多糖中无蛋白质、多肽及核酸；红外光谱(Infraredspectrum，工R)表明，样品具有典型的多糖特征吸收峰(3419、2937、1638、1418、¨16、619cm-1)；结果显示APS组小鼠外周血WBC、LC数明显高于NS组(P<0．05)。
结论：本研究采用的提取，分离，纯化方法简单易行，所得到的中性APS纯度高，是普通实验室都能进行的高纯度APS方法。以BALB／c小鼠为实验动物模型，APS对小鼠外周血WBC、LC数有明显升高作用，为进一步研究APS对HSPC的动员作用提供理论指导和实验依据。