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[目的] 在建立小肠缺血—再灌注(I/R)损伤模型基础上,通过用利多卡因干预,检测肠组织中TNF—α和ICAM—1的表达,探讨利多卡因对幼鼠肠缺血—再灌注损伤肠组织的保护作用。
[方法] 将48只4周龄Sprague Dawley(SD)大鼠随机分成三组,每组各16只:(1)假手术组(Sham组),仅暴露腹腔脏器,不作任何干预;(2)缺血再灌注模型组(I/R组),再灌注前经股静脉注射生理盐水0.5ml作为对照;(3)利多卡因干预组,再灌注前经股静脉注射利多卡因2mg/kg(稀释在0.5ml的生理盐水中)。再灌注后30min、60min、90min、120min每组动物各处死4只取小肠组织进行病理学研究和Chiu氏评分,通过免疫组织化学方法进行小肠组织染色,对TNF—α和ICAM—1的表达情况进行研究。结果应用SPSS11.0统计软件进行统计分析处理,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组内比较采用配对t检验,组间比较采用单因素方差分析,取检验水准α=0.05,以P<0.05表示有统计学意义。
[结果]
1.假手术组由于只是游离肠系膜上动脉而未央闭,小肠组织血供良好,肠壁无充血,水肿,无出血点及溃疡,未见有明显的炎性渗出物。缺血再灌注模型组小肠壁明显充血,水肿,颜色呈暗红色,严重部分呈紫色,肠组织中可见有明显的炎性渗出物。利多卡因干预组小肠壁颜色苍白,肠壁出血水肿,可见少量的出血点,溃疡及少量的炎性渗出物。
2.普通H—E染色后,假手术组小肠组织为正常的粘膜绒毛结构,肠绒毛上皮细胞呈桩状,刷状缘清晰,排列整齐。小肠粘膜Chiu氏6级评分在再灌注30min、60min、90min、120min分别为0.26±0.40、0.25±0.47、0.17±0.55、0.39±0.50。缺血再灌注模型组小肠组织出现明显的病理损伤,随再灌注时间的延长,损伤逐渐加重:小肠绒毛上皮细胞脱落,固有层充血、水肿,部分区域有出血,其间有较多炎性细胞浸润及溃疡形成,小肠粘膜Chiu氏6级评分相应时相点分别为3.00±0.89、4.02±0.69、4.87±0.73、4.01±0.64。利多卡因干预组的损伤的变化趋势与缺血再灌注模型组的基本相同,但损伤程度较缺血再灌注模型组轻,两组间差异有显著性。利多卡因干预组其评分值比相应时相点的假手术组的高,小肠粘膜Chiu氏6级评分相应时相点分别为2.00±0.78、3.01±0.49、3.06±0.53、1.94±0.43,两组间有统计学差异。
3.免疫组化染色检测结果显示,缺血再灌注模型组肠组织中TNF—α和ICAM—1含量从再灌注30min开始逐渐升高,到再灌注90min达到顶峰,以后逐渐下降。各时间点缺血再灌注模型组肠组织中TNF—α和ICAM—1的含量要显著高于假手术组,两组间差异有显著性。利多卡因干预组肠组织中TNF—α和ICAM—1的含量变化基本同缺血再灌注模型组,但各时间点组肠组织中TNF—α和ICAM—1的含量要明显较缺血再灌注组低,两组间有统计学差异。
[结论]肠缺血—再灌注损伤造成肠组织的病理改变和肠组织中TNF—α和ICAM—1的含量增加,利多卡因能够减轻肠组织的这种病理改变,并下调TNF—α和ICAM—1的表达,利多卡因对生长发育期动物的肠组织缺血—再灌注损伤有保护作用。