现场检测A型流感病毒核蛋白的纳米磁珠免疫层析方法研究

• 作 者: 汤闻博
• 机 构: 中国科学院大学
• 出 处: 中国科学院研究生院 中国科学院大学
• 发表日期: 2010年期

流感是人类最常见的传染病。流感病毒依据核蛋白(NP蛋白)的抗原性分为A、B、C三种类型。A型流感病毒(InfluenzaAVirus,IAV)致病性最强,是引起人类呼吸道传染病流行和畜禽死亡的主要病原。目前针对A型流感病毒的检测位点主要是病毒表面的血凝素和神经氨酸酶。但是A型流感病毒的血凝素和神经氨酸酶抗原具有极强的变异性,研制出的检测试剂往往只能针对一种亚型的病毒,缺乏普遍适用性,并且对突变后的病毒就可能不具有检测能力。而NP蛋白质非常稳定,不同亚型流感病毒的NP蛋白质的抗原性基本一致。因此,发展针对NP蛋白的快速检测方法,对流感的防控具有重要意义。　　
免疫层析技术是20世纪90年代初发展起来的一种免疫检测技术,多采用胶体金作为示踪标记物,具有快速、简便、经济等优点,已广泛应用于医学检测、食品质量监测、环境监测、农业和畜牧业、出入境检验检疫等领域。目前,免疫层析技术的发展方向是定量检测、高灵敏度检测、多元检测等,其中磁信号检测是近两年定量免疫层析技术的研究热点。相对于传统的胶体金免疫层析技术,结合了磁信号阅读仪的纳米磁珠免疫层析具有试剂简便、定量准确、背景值小、信号稳定等优点。本研究制备了针对NP蛋白的鼠源多克隆抗体,发展了一种基于纳米磁珠免疫层析的检测技术,用于快速检测A型流感病毒NP蛋白。通过考察一些效用物质(表面活性剂、盐离子、高聚物)对试纸条特异性与灵敏度的影响,最终用磁信号阅读仪实现了对NP蛋白的较高特异性和较高灵敏度检测。本文还对应用纳米磁珠免疫层析技术检测血清中A型流感病毒NP蛋白抗体作了相关研究。