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糖尿病是威胁人类生命健康的主要疾病之一,苦瓜作为我国传统医学中糖尿病的食疗药物,为糖尿病的防治提供了一种新颖、安全、可靠的选择。本论文是关于苦瓜提取物中降糖物质的分离纯化及其理化性质鉴定的研究。文中以体外胰岛β细胞的增殖与胰岛素分泌实验作为活性检测指标,通过色谱方法分离、筛选苦瓜提取物中的活性成分,并对其可能的降糖机制进行初步探讨。生化分析结果显示,苦瓜提取物的蛋白质含量为11.48%,总糖含量为8.03%;氨基酸组成中以谷氨酸、天门冬氨酸和精氨酸含量最高;葡萄糖、果糖和鼠李糖是其中主要单糖;全波长扫描的最高吸收峰值位于290nm;其分子量主要富集于128KDa、20KDa、5.7KDa和300Da附近。首先,选取截留分子量为8000Da的透析膜对苦瓜提取物进行初步分离,发现分子量小于8KD的小分子组分(MCE-L)具有修复受损胰岛β细胞作用,而分子量大于8KD大分子物质(MCE-H)则具有刺激β细胞分泌胰岛素功能。其次,用SP-650M阳离子交换色谱对MCE-L组分进行分离,得到8个组分;其中Peak 7能够使受四氧嘧啶破坏的β细胞存活率提高115.13%;用C18反相色谱柱进一步分离,发现五个组分中Peak 2的修复效果最佳。超氧化歧化酶(SOD)活性实验发现,具细胞修复活力的分离组分也同样具有较高的SOD活性,因此推断苦瓜提取物对β细胞的修复作用与其清除超氧自由基能力有关。毛细管液相色谱CLC鉴定C18-Peak2样品为双组分。使用Superdex Peptide 10/300GL高效凝胶过滤色谱柱进行分析,两者相对分子量分别为1153.55和761.74Da。取含量较高的后者进行MALDI-TOF-MS分析,其精确分子量为777.87Da;红外光谱分析显示该分子中含有β-D-吡喃葡萄糖和α-D-呋喃果糖结构单体。以上结果,为苦瓜提取物中多种活性成分的分离纯化奠定了基础,为苦瓜的降糖作用提供了较好的科学依据。对于苦瓜降糖机理的最终阐明和新型糖尿病药物的开发有一定的指导意义。