蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织OL和OPC细胞凋亡的影响

来源 :河南中医药大学 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qweasd21
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目的:(1)观察蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠神经行为学和少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)、少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPC)凋亡的影响。(2)比较蒲金口服液高、低剂量、银杏叶提取物和早期干预、晚期干预对早产脑损伤大鼠髓鞘再生与修复的作用。(3)探讨“痰”和“瘀”是宫内感染/炎症造成早产儿脑损伤的主要病理基础,为早期应用活血化瘀、化痰开窍药物干预治疗提供实验依据。方法:(1)动物模型制作:将30只孕鼠随机分为脂多糖(LPS)组(n=24只)和对照组(n=6只),分别在孕第16、17天连续2天腹腔注射LPS 350ug/kg和同等剂量生理盐水,孕龄<22天分娩的仔鼠为早产鼠。(2)实验动物分组:将LPS组早产仔鼠80只随机分为8组,每组10只。分别为:早期药物干预组A1、B1、C1、D1,晚期干预组A2、B2、C2、D2,其中A1、A2为蒲金口服液低剂量组,B1、B2为蒲金口服液高剂量组,C1、C2为银杏叶提取物组,D1、D2为模型组。(3)干预方法:早期药物干预组生后0日龄灌胃给药,晚期药物干预组生后7日龄灌胃给药,均连用7d。干预后同条件饲养至21日龄。进行神经行为学测试(采用悬吊试验、斜坡试验、Cylinder试验)。(4)观测指标:母鼠造模后孕产情况。取子宫及胎盘行HE染色观察宫内感染/炎症情况。两组所产仔鼠的出生体重、颜色、反应能力、活动情况。两组仔鼠生后0日龄取脑组织行免疫荧光染色检测OL、OPC的受损和凋亡情况。21日龄取8组仔鼠脑组织行免疫荧光染色检测OL及其前体细胞的受损和凋亡情况。结果:(1)一般情况:LPS组孕鼠造模后容易发生流产和早产,且有难产死亡现象。与对照组孕鼠相比,LPS组孕鼠产仔鼠数少(P<0.05)。LPS组早产仔鼠与对照组相比体重低(P<0.05)、活动少、皮肤颜色紫绀、应激反应弱。(2)HE染色病理形态学改变:LPS组孕鼠子宫及胎盘组织病理检测见血管充血以及大量中性粒细胞浸润,对照组子宫及胎盘组织病理检测未见炎性反应;LPS组早产仔鼠病理检测见脑白质、内囊和胼胝体结构稀疏,神经纤维排列不齐,神经元数目较少,并可见侧脑室及脑白质内出血以及胶质细胞聚集。(3)神经行为学能力:与模型组相比,蒲金口服液高、低剂量和银杏叶提取物均可提高早产脑损伤仔鼠神经行为学能力(P<0.05),且早期干预效果明显优于晚期干预(P<0.05)。但蒲金口服液高、低剂量与银杏叶提取物在提高早产脑损伤仔鼠神经行为学能力方面三组间两两比较无明显差异(P>0.05)。(4)实验室检查结果:与对照组所产仔鼠(0日龄)相比,LPS组仔鼠脑组织中OL及OPC数量明显减少(P<0.05)。早期药物干预组中,与模型组相比,蒲金口服液高、低剂量与银杏叶提取物均能明显抑制OL及OPC的凋亡(P<0.05)。蒲金口服液高、低剂量和银杏叶提取物三组之间比较,且蒲金口服液高剂量减少OL及OPC凋亡的作用明显优于蒲金口服液低剂量和银杏叶提取物(P<0.05),但蒲金口服液低剂量和银杏叶提取物之间在减少OL及OPC凋亡的作用方面无明显差异。晚期药物干预组中,与模型组相比,蒲金口服液高、低剂量与银杏叶提取物均能明显降低仔鼠脑白质OL及OPC的凋亡(P<0.05)。蒲金口服液高、低剂量和银杏叶提取物三组之间比较,蒲金口服液高剂量减少OL及OPC凋亡的作用明显优于蒲金口服液低剂量和银杏叶提取物(P<0.05),且银杏叶提取物在减少OL及OPC凋亡的作用方面较蒲金口服液低剂量明显。与晚期药物干预组相比,蒲金口服液高、低剂量和银杏叶提取物的早期干预减少OL及OPC细胞凋亡的作用更明显。结论:(1)宫内感染可导致早产脑损伤仔鼠神经行为学改变,造成脑组织中OL、OPC细胞数量明显减少。(2)蒲金口服液可抑制宫内感染致早产仔鼠脑组织中OL、OPC细胞的受损与凋亡,且早期药物干预作用更明显。这为早期应用活血化瘀和化痰开窍药物干预宫内感染致早产脑损伤提供实验依据。(3)研究证实宫内感染/炎症致早产儿脑损伤的中医病理机制主要是“痰”和“瘀”的理论。
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