论文部分内容阅读
目的:本课题通过运用LSAB免疫组化技术和荧光定量PCR技术来探讨和验证经典Wnt通路中的重要成员Wnt1(Wingless-Type-1)、β-catenin、APC(Adenomatous polyposis coli)、cyclin D1在胃癌(Gastric Carcinoma, GC)中的表达及临床意义,进一步为胃癌的防治提供新的思路。
方法:收集河北北方学院附属第二医院和解放军第251医院病理科2005-2008年的原发性胃癌术后标本45例,以手术残端正常胃组织为对照,所有手术切除后标本分为两份:一份立即放入液氮罐内保存(-80℃);另一份用10%福尔马林溶液固定,制作好石蜡标本备用,并均经病理检查证实诊断。①常规石蜡切片4μm。微波-EDTA缓冲液抗原修复、LSAB免疫组化染色后光镜观察胃癌组织与正常组织中的Wnt1、β-catenin、APC、cyclin D1的表达情况,进一步分析与临床病理特征的关系。②运用荧光定量PCR技术对胃癌组织与正常组织中β-catenin的mRNA表达水平进行定量分析。
结果:①45例GC的Wnt1、β-catenin、cyclin D1的阳性率是分别为57.78%、73.33%和51.11%,正常对照组织几乎不表达,相比具有统计学意义(P<0.01); APC在GC中表达的阳性率为(53.33%),低于正常组织(91.11%),统计学上有明显差别(P<0.01)。在胃癌标本中,Wnt1、β-catenin、cyclin D1同时高表达,即Wnt通路处于活化状态(Wnt+)占44.44%(20/45),与正常组织中(Wnt+)相比差别明显(P<0.01)。②免疫组化平均光密度结果显示Wnt1、β-catenin、 APC、cyclin D1的表达高低与患者性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05),与肿瘤分期有明显关系(P<0.01);其中Wnt1、β-catenin和cyclin D1在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.01或P<0.05),而未发现APC存在明显差别。在不同分化程度之间,上述基因阳性表达率、平均光密度值差异同样具有显著性(P<0.01或P<0.05),并且与浸润深度有关(P<0.01或P<0.05)。③通过FQ-PCR检测,与正常组织相比,GC中β-catenin的mRNA表达水平明显增高(P<0.01)。
结论:①在经典Wnt通路中,其重要成员Wnt1、β-catenin、cyclinD1在GC中呈高表达,而APC则低表达;②存在Wnt1、β-catenin、cyclin D1高表达即Wnt通路的活化状态;③Wnt1、β-catenin、APC、cyclin D1的表达高低与淋巴结转移、分化程度、浸润深度、临床分期有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小无关;④GC中β-catenin的mRNA表达量明显高于正常组织。