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籽粒硬度是国内外小麦市场分级和定价的重要依据,影响面粉颗粒度大小、出粉率、润麦加水量、破损淀粉粒数量，是小麦品质性状之一，最终决定小麦的加工品质。本实验利用单籽粒谷物特性测定仪、PCR扩增、酶切、基因克隆及核苷酸测序技术，对青藏高原小麦籽粒硬度的籽粒性状及Puroindoline基因分子多样性进行研究，主要得到以下结果： 1、66份青海育成小麦品种和123份西藏地方小麦品种，其籽粒千粒重与籽粒粒径均呈极显著正相关，相关系数分别为0.898和0.661；籽粒千粒重和硬度值均呈负相关，相关系数分别为0.230和0.249；籽粒粒径与硬度值之间，前者呈负相关，后者呈正相关，相关系数分别为0.125和0.096。 2、采用Pinb全长引物扩增Pinb基因全长后，通过PvuⅡ酶切鉴定Pinb-D1c类型和采用Pina-D1b鉴定引物PCR扩增鉴定Pina-D1b类型的结果均与核苷酸序列测序结果一致。 3、Pin基因序列测序表明青藏高原春麦区Pin基因存在丰富变异包括野生型和5种突变型。该地区的Pin基因突变型均以单突变类型出现。66份青海育成小麦品种中，野生型品种有39份，Pina-D1b品种有10份，Pinb-D1b品种有10份，Pinb-D1c品种有6份，Pinb-D1x品种有1份。123份西藏地方小麦品种中野生型品种有63份，Pinb-D1c品种有26份，Pinb-D1b品种有17份，Pina-D1b品种有12份，Pinb-D1p品种有5份。 4、青藏高原春麦区Puroindoline基因的各种变异类型的籽粒硬度平均值从大到小的顺序依次排列为Pinb-D1c＞Pina-D1b＞Pinb-D1b＞Pinb-D1p＞野生型。西藏地方小麦品种中各种Puroindoline基因突变型的籽粒硬度平均值均显著高于野生型；Pina-D1b与Pinb-D1c品种籽粒硬度值之间差异不显著，但均显著高于Pinb-D1b和Pinb-D1p类型；Pinb-D1b品种籽粒硬度值显著Pinb-D1p。由于Pinb-D1x品种仅有1份，未与其它变异类型进行比较。 5、Pinb-D1x突变型在青海首次被发现，Pinb-D1c和Pinb-D1p突变型在西藏首次被发现，可为研究Pin基因类型的分布提供一定的理论依据。