银杏叶提取物通过TGF-β/Samds信号通路对高糖培养大鼠晶状体浑浊的防治作用

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目的:观察银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba, GBE)对高糖培养的大鼠晶状体浑浊的防治作用。  方法:M199培养液培养分离的大鼠晶状体组织,将离体晶状体分为正常对照组(NS组,葡萄糖终浓度2.40 mmol/L);高糖组(HG组,葡萄糖终浓度52.4mmol/L);GBE低剂量组(GL组,10μg/ml GBE-HG培养基),GBE中剂量组(GM组,20μg/ml GBE-HG培养基),GBE高剂量组(GH组,40μg/ml GBE-HG培养基),苄达赖氨酸(bendazac lysine,BDL)对照组(BDL组,0.5μmol/L BDL-HG培养基)。培养5d后收集晶状体组织。CCD显微镜观察大鼠晶状体浑浊情况,并用NIH Image J图像处理软件计算离体培养晶状体图像灰度值;可见光分光光度法测定过氧化氢酶(catalase,CAT),谷胱甘肽(glutathione,GSH)和总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)三种抗氧化指标的水平;荧光分光光度法测定AGEs含量;ELISA法测定晶状体中TGF-β2(transforming growth factor-β2)的含量;Real-Time PCR测定TGF-β2、α-SMA、E-cadherin mRNA的水平;免疫印迹法测定醛糖还原酶(aldose reductase,AR)、Smad2/3、 E-cadherin、α-SMA(alpha-sooth muscle actin)蛋白表达水平。  结果:在离体培养的晶状体组织上,NS组晶状体清亮、透明,HG组的晶状体与NS组相比浑浊度明显增高(P<0.01),GBE中、高剂量组明显减轻了高糖诱导的晶状体浑浊(P<0.01)。与NS组比较,HG组晶状体组织中抗氧化酶活力明显降低(P<0.01)、AGEs含量及AR蛋白表达显著增高(P<0.01);且TGF-β2、Smad2/3、α-SMA的蛋白水平表达明显升高(P<0.01);而E-cadherin显著降低(P<0.01)。与HG组相比,GM、GH组的大鼠CAT、T-SOD和GSH酶活力明显增强(P<0.05或P<0.01),GM、GH组的大鼠AGEs含量和AR蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01),GBE三个剂量组和BDL组均可降低晶状体内TGF-β2、Smad2/3、α-SMA表达水平(P<0.01或P<0.05),并升高E-cadherin的表达。  结论:GBE可能通过增强晶状体的抗氧化能力、抑制AGEs的生成和AR蛋白的表达、阻断TGF-β/Smads信号通路激活引起的上皮细胞转分化过程,从而改善晶状体的浑浊,发挥对DC的防治作用。
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