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目的： 宫颈癌是世界范围内最常见的妇科肿瘤之一。虽然发达国家宫颈癌的发病率和死亡率都已显著下降，但宫颈癌仍然是女性生殖道最常见的恶性肿瘤之一。据统计，全球每年约有50万子宫颈癌新发病例，其中80％的患者发生在包括中国在内的发展中国家[1]。我国宫颈癌死亡率一直居于女性各种恶性肿瘤死亡率的前三位，说明我们防治宫颈癌的任务仍很艰巨。关于宫颈鳞状上皮内瘤变及鳞状细胞癌发生、发展机制及预后影响因素的研究一直是我们临床病理工作的重点之一。 研究发现人体多种肿瘤中存在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)基因的过表达，且EGFR过表达的肿瘤侵袭性高于低或正常表达的肿瘤。目前关于EGFR在宫颈癌形成中的作用了解不多，结论尚不一致。本课题首先研究EGFR在宫颈鳞状上皮内瘤变及鳞状细胞癌中的蛋白表达、基因扩增及拷贝数变化，探讨其在宫颈癌发生、发展和预后评估中的价值。其次，我们分析了宫颈鳞状上皮内瘤变及鳞状细胞癌中EGFR蛋白表达与P16、Ki67之间的关系。最后，我们在宫颈各级鳞状上皮内病变细胞学样本中，应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)技术检测了EGFR基因的扩增情况，初步探讨检测EGFR基因扩增及FISH技术本身在宫颈癌细胞学筛查中的应用前景。 方法： 1、应用免疫组化EnVision法检测了75例宫颈各种病变组织(慢性宫颈炎10例、低级别鳞状上皮内瘤变(CIN)16例、高级别CIN25例、宫颈癌24例）中EGFR、P16及Ki67的蛋白表达; 2、应用FISH技术检测了75例宫颈各种病变组织中的EGFR基因扩增及基因拷贝数变化; 3、应用FISH技术检测79例宫颈各种病变液基细胞学样本中的EGFR基因扩增情况。同时应用杂交二代(HCⅡ)技术检测了部分低度鳞状上皮内病变病例中的高危型人乳头瘤病毒(hrHPV)的病毒负荷量。 结果： 1、EGFR在76％(19/25)的高级别CIN和79.17％(19/24)的宫颈癌中呈阳性表达，而慢性宫颈炎和低级别CIN中的阳性表达率分别是10％和43.75％。高级别CIN和宫颈癌的EGFR表达明显高于低级别CIN和慢性宫颈炎，差异有统计学意义（P＜0.05），而EGFR在低级别CIN和慢性宫颈炎中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。 2、EGFR区分慢性宫颈炎和低级别CIN的敏感性为44％，低于P16和Ki-67，差异均有统计学意义（P＜0.05; P＜0.01）;特异性为90％，高于P16和Ki-67，但差异无统计学意义（P＞0.05）。EGFR区分慢性宫颈炎和低级别CIN的PPV为87.5％，高于P16和Ki-67，但差异无统计学意义（P＞0.05）;而NPV为50％，低于P16和Ki-67，差异亦无统计学意义（P＞0.05）。EGFR/P16与EGFR/Ki-67联合检测在区分慢性宫颈炎和低级别CIN中的敏感性、特异性、PPV和NPV的差异均无统计学意义（P＞0.05）。 3、EGFR在区分低级别CIN和高级别CIN中的敏感性低于P16和Ki-67，差异具有显著统计学意义（P＜0.01）;特异性为87.50％，介于P16和Ki-67之间，但差异均无统计学意义(P＞0.05)。EGFR在区分低级别CIN和高级别CIN中的PPV和NPV分别为75.00％和42.42％，均低于P16，但差异无统计学意义（P＞0.05），其NPV明显低于Ki-67，差异有显著统计学意义（P＜0.01）。EGFR/P16和EGFR/Ki-67联合检测区分低级别CIN和高级别CIN的敏感性、特异性、PPV和NPV的差异均无统计学意义（P＞0.05）。 4、EGFR在宫颈高分化与中分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为77.78％和80％，差异无统计学意义（P＞0.05）;EGFR在无淋巴结转移宫颈鳞状细胞癌中的阳性表达率(73.68％)虽低于有淋巴结转移者(100％)，但差异亦无统计学意义(P＞0.05)。 5、高级别CIN/鳞癌组中EGFR基因扩增阳性率为20.51％(8/39)，而慢性宫颈炎/低级别CIN组的阳性率为4.35％(1/23)，差异无统计学意义（P＞0.05）。42例EGFR蛋白表达阴性或低等程度阳性病例中FISH检测到的二体性和三体性分别为26例(61.90％)和11例(26.20％)，而20例中等或强阳性表达者有13例(65.00％)表现为多体性或单纯EGFR基因扩增，基因拷贝数增加与蛋白阳性表达密切相关（P＜0.05）。所有EGFR基因扩增病例其蛋白表达均为中到强阳性。 6、宫颈液基细胞学样本中，EGFR基因在正常、LSILs和HSILs中的扩增阳性率分别是0％、8.33％和30.00％，EGFR基因在HSILs中的扩增阳性率明显高于正常，差异有统计学意义（P＜0.05），但和LSILs相比差异无统计学意义(P＞0.05)。 7、LSILs随访阳性病例的EGFR基因扩增阳性率（18.18％和20.00％）与随访阴性病例(0％)之间也有较大差异，但差异并无统计学意义（P＞0.05）。另外，我们检测了部分病例中的hrHPV病毒负荷量。hrHPV病毒负荷量在LSILs随访阳性与随访阴性病例之间差异无显著性（P＞0.05）。 结论： 1、EGFR可能参与了宫颈癌的发生，并且是宫颈癌发生过程中的一个早期事件;EGFR蛋白表达的检测可有助于CIN的诊断与分级，EGFR与p16或Ki-67联合检测可提高CIN诊断和分级的准确性。 2、EGFR蛋白过表达可能是EGFR基因扩增或基因拷贝数增加所致。 3、EGFR基因扩增在HSILs与随访阳性LSILs中明显增高，提示EGFR基因扩增与高级别宫颈细胞学病变密切相关; 4、FISH技术检测特异性基因状态可用作细胞学筛查的补充，提高筛查的特异性。FISH技术检测EGFR基因扩增可用作巴氏试验中筛查HSILs与预测持续或进展性LSILs的客观遗传学监测指标。