BSM对不同类型烟草生物碱的影响及茉莉酸含量检测

• 作 者: 苏雷
• 机 构: 中国科学技术大学
• 出 处: 中国科学技术大学
• 发表日期: 2012年期
• 关键词: 仿生型信号分子 烟草生物碱 烟碱转化 高效液相色谱-质谱 茉莉酸 含量检测

用源于取食烟草的寡食性昆虫口腔分泌物的仿生型信号分子(BSM)作用于白肋烟B37不同转化率株。利用HPLC检测不同转化率株生物碱含量，并分析生物碱比例和烟碱转化率的变化。结果表明：BSM使四种生物碱含量及总生物碱含量总体上有所降低，其中对降烟碱的影响程度最大。BSM对非转化株的上部叶和中部叶尼古丁比例影响小，而对高转化株B37-38作用最甚，其上部叶尼古丁比例提高了15.5％、中部叶提高了10.4%;B37-38上部叶降烟碱比例降低了15.2%、中部叶降低了10.0%。随着不同株系的烟碱转化率的提高，BSM使其降烟碱的比例降低幅度增加，BSM对高转化率株的影响大。　　
经BSM作用，云烟87、CB-1、鄂烟1号三个品种总体趋势都是上部叶和中部叶烟碱比例上升，其他三个主要生物碱比例下降。三个品种中都是降烟碱的降低率最大，其中鄂烟1号最大，上部叶降低率是60.1%，中部叶是59.1%。其次是云烟87，上部叶降低率是51.0%，中部叶是34.9%。BSM总体上对三个烟草品种主要生物碱的影响顺序是鄂烟1号＞云烟87＞CB-1。　　
采用高效液相色谱，质谱联用（HPLC-MS）法检测烟草中茉莉酸含量。样品研磨均质后经丙酮和柠檬酸萃取，离心分离，取上清液，氮气吹去丙酮后用乙醚萃取。经氨丙基固相萃取柱净化，吹干后用色谱流动相溶解，过0.45μm有机滤膜。利用高效液相色谱-质谱联用电喷雾负离子，选择离子监测模式进行检测。试验结果表明：用内标法进行定量，待测样品JA浓度范围在5～1000ng/mL之间，标准曲线具有良好的线性关系。JA的检出限是2.0ng/mL(S/N≥3)。JA浓度为5～1000ng/mL时，平均回收率为80.6～101.1%，相对标准偏差为3.5～14.6%。应用本方法检测烟草打顶与不打顶植株之间JA含量的差异，结果比较理想。　　
为了探讨仿生型信号分子(BSM)抑制打顶后烟草生物碱积累的机制，研究了不同处理植株间JA含量的变化，结果表明：打顶后烟草叶部和根部的JA含量增加，BSM处理可以抑制JA含量的增加幅度，且对根部JA含量有显著的抑制作用，在6h降低了38.5%。BSM抑制打顶后烟草植株中生物碱的积累机制是抑制了创伤信号路径上游的LOX活性，继而抑制了JA的含量及ODC的活性，从而最终降低了烟草植株中生物碱的含量。