龙须菜寡糖制备工艺优化及抗氧化活性研究

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本文利用一株从深海沉积物中筛选到的可直接降解龙须菜产生寡糖的菌株Flammeovirga sp.wpaga001进行了寡糖酶解制各条件优化和活性研究。  Flammeovirga sp.wpaga001菌株可在仅含有龙须菜和海水的培养基中生长并能降解龙须菜产生寡糖,对其酶解条件进行初步优化,结果表明:5%的接种量,5%的龙须菜浓度,50~60目底物颗粒粗细,50 mL/250 mL的装液量,37℃、200r/min摇培时产糖量最佳。酶解培养基中完全不需另添加其他的营养因子,也可以用1%NaCl和蒸馏水替代海水。  对发酵液中龙须菜寡糖产物的制备技术进行了初步的优化,在储存温度方面,比较了常温(25℃)和低温(10℃)下的保藏效果,结果表明,低温放置保藏效果更佳,常温下放置10天后产物中五糖的损失较大。将发酵产物制备成干粉状态更有利于保存。在除菌方面,比较了过滤、70℃和115℃下灭菌等方法,结果表明采用过滤或115℃加热进行除菌效果最佳;在浓缩方面,比较了真空干燥、冷冻干燥和喷雾干燥等方法,结果表明用冷冻干燥进行浓缩效果最佳。在此基础上,建立了利用多层膜过滤技术制备龙须菜寡糖的工艺。  对龙须菜寡糖的生理活性开展了研究。首先,该寡糖具有显著的水果保鲜效果。在常温储藏时,寡糖可显著提高荔枝、龙眼及杨梅的好果率,减缓水果中Vc和总酸的转换,较好地保持营养成分水平,且基本上防止了褐变,延长了贮藏期和货架寿命。经过寡糖处理后,在常温贮藏下储藏8天后仍能基本保持原有风味和品质,可食性大大增强。进一步的研究表明,寡糖在120 ppm对荔枝的保鲜效果最好,好果率比对照提高25%,失重率仅为3.18%;在130 ppm时对龙眼的保鲜效果最好,好果率比对照提高26%,失重率仅为16.13%;而在160 ppm对杨梅保鲜效果好。利用BALB/c小鼠检测寡糖对CCl4造成的肝损伤的保护作用。结果表明,连续饲喂寡糖七天后的小鼠对CCl4造成的急性肝损伤有明显的保护作用,有效保护剂量为200 mg/(kg.BW)。  海藻寡糖的应用目前仍停留在实验室阶段,其瓶颈因素之一是缺乏高效制备寡糖的工艺。本研究获得了可直接高效制备海藻寡糖的制备工艺,不需先提取琼胶再进行降解,工艺较为简单,无污染,成本低;所制备的龙须菜寡糖除了具有本论文中的抗氧化活性之外,有多种生理活性已经得到了证实。因此,本论文所建立的技术和获得的研究结果具有较好的科研和应用价值。
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