【摘 要】
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根据GenBank数据库中已报道的人肝再生增强因子（hALR）mRNA全序列（AF146394）设计一对特异引物，以人胎肝mRNA为膜板反转录合成cDNA第一条链，PCR扩增获得471bp DNA片段，克隆到pMD18-T载
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根据GenBank数据库中已报道的人肝再生增强因子（hALR）mRNA全序列（AF146394）设计一对特异引物，以人胎肝mRNA为膜板反转录合成cDNA第一条链，PCR扩增获得471bp DNA片段，克隆到pMD18-T载体，命名为pMD-ALR，测序分析结果与GenBank中报道完全相同。酶切pMD-ALR，回收hALR片段，插入到含有甜瓜果实黄瓜素（Cucumisin）基因启动子的果实特异性表达载体pPZP-CGN，构建了植物中间表达载体pPZP-CAN。以花粉管通道法转化试验大田自花授粉植株，获得T0代转化种子。培养T0代种子得到无菌瓶苗，提取其总DNA进行PCR、PCR-Southern和斑点杂交检测，获得了转基因T0代种子，为进一步研究以河套蜜瓜为生物反应器生产hALR药物蛋白因子奠定了基础。同时，为了进一步研究河套蜜瓜子叶的遗传转化，农杆菌介导法转化愈伤组织，经筛选获得了庆大霉素抗性瓶苗，提取其总DNA经PCR、PCR-Southern杂交和斑点杂交检测，获得了转基因瓶苗。
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