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在芽胞杆菌属中，蜡样芽胞杆菌群如炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌等能够在营养缺乏的不良环境中产生高度抗逆性的芽胞。芽胞最外层包裹着一层宽大、膨松的芽胞外壁，它对芽胞粘附、致病菌传播、靶标锚定及萌发调控起着一定作用。诸多研究曾致力于鉴定芽胞外壁蛋白质，但目前为止只有少数被鉴定出，且它们在决定芽胞结构和功能中的作用还知之甚少。 本研究以无晶体苏云金芽胞杆菌8010为出发菌株，选用温敏载体pRN5101，通过酶切、连接和PCR，构建了含芽胞外壁蛋白exp基因上游序列、卡纳基因、exp基因下游序列的基因敲除载体pRN-ExpK。采用同源重组技术敲除了无晶体苏云金芽胞杆菌8010芽胞外壁蛋白exp基因，成功获得exp基因缺失突变株。通过测定生长曲线、芽胞抗逆性、疏水性、芽胞萌发及电子显微镜观察等方法分析突变株与出发菌株的表型及性质差异。结果表明，突变株生长速率低于出发菌株，芽胞热抗性、溶菌酶及化学药品抗性也有所下降。但疏水性实验表明，Exp蛋白对芽胞外壁表面的疏水性和吸附特性影响不大。芽胞外壁除了具有防御功能外还可能有助于营养生长的恢复。为此，利用萌发剂L-丙氨酸、肌苷等诱导芽胞萌发结果表明，突变株芽胞萌发速率加快。此外，电子显微镜下突变株芽胞干瘪褶皱，胞子仅松弛地结合在易碎的芽胞外壁上，部分芽胞外壁甚至完全脱离，呈碎片状散落。这些结果证明芽胞外壁蛋白Exp作为芽胞外壁的组成成分，起到增强芽胞抗性、阻止芽胞过早萌发的作用，对形成强健的芽胞外壁具有重要意义。 本研究初步探讨了芽胞理化特性和芽胞外壁蛋白基因的功能，有助于阐明蜡样芽胞杆菌芽胞形成及萌发调控机制，为进一步研究产晶体苏云金芽胞杆菌中芽胞和伴胞晶体形成机制奠定了基础。