论文部分内容阅读
目的：观察不同数量神经干细胞(NSCs)鞘内注射对坐骨神经半切断(PST)大鼠神经病理性疼痛行为；及脊髓背角、背根神经节(DRG)脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达变化的影响，旨在探讨NSCs移植治疗神经病理性疼痛的适宜移植剂量，探讨其可能机制。
方法：84只成年雄性SD大鼠随机分成7组(n=12)：Ⅰ．假手术组(Sham)Ⅱ.模型组(PST)Ⅲ.PST+NSCs(1×103)Ⅳ.PST+NSCs(1×104)V.PST+NSCs(1×105)Ⅵ．PST+NSCs(1×106)Ⅶ.PST+NSCs(1×107)，制作模型，Ⅰ组只暴露右侧坐骨神经，不切断，Ⅱ至Ⅶ组大鼠制作右侧PST模型，术后3天，Ⅰ、Ⅱ组鞘内注射培养基30ul，Ⅲ至Ⅶ组鞘内注射NSCs30ul，其细胞数量分别为1×103、1×104、1×105、1×106、1×107，术前1d，术后1、3、7、14、21d随即取6只大鼠测同侧足机械缩足阈值(mechanical withdrawl threshold，MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency，TWL);术后7d和21d测痛阈后分别取6只大鼠，采用免疫组织化学染色和real-time PCR技术检测同侧腰膨大脊髓背角及L5DRG的BDNF、GDNF的表达变化。
数据以均数±标准差(x±s)表示，采用SPSS16.0统计软件处理。机械缩足阈值、热缩足潜伏期、GDNF、BDNF mRNA及蛋白表达，组内比较采用双因素方差分析，组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05，为差异有统计学意义。
结果：1．与Ⅰ组比较，Ⅱ至Ⅶ组术后1、3、7、14d痛阈下降(P＜0.05)，7至14d阈值最低，术后21d，Ⅱ至Ⅳ组阈值低于Ⅰ组(P＜0.05)，Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组与其差异无统计学意义；与Ⅱ组比较，Ⅲ组与其无统计学差异（P＞0.05），Ⅳ至Ⅶ组，术后7、14、21d，痛阈增高(P＜0.05)；与Ⅶ组比较，术后7天，Ⅰ至Ⅵ组与其差异均有统计学意义(P＜0.05)，术后14、21d，Ⅴ、Ⅵ组与其比较无统计学差异，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组与其比较，阈值低，差异有统计学意义(P＜0.05);
2．术后7天，脊髓背角及DRG的BDNF、GDNF表达量，随着移植量的增加逐渐增加，与Ⅶ组比较，Ⅰ至Ⅵ组与其有统计学差异（P＜0.05）；术后21d，第V组脊髓背角、DRG的GDNF表达量最高，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ组与其比较，差异有统计学意义（P＜0.05），而BDNF的表达量，Ⅰ至Ⅳ组表达量低，与第V组比较有统计学差异（P＜0.05），Ⅵ、Ⅶ表达量与其比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
结论：鞘内注射1×105的NSCs移植量，能最有效改善PST大鼠神经病理性疼痛行为，与大鼠脊髓背角、DRG的BDNF及GDNF的表达变化一致。