人羊膜对大鼠坐骨神经急性卡压修复的实验研究

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目的:周围神经损伤(peripheral nerve injury,PNI),是临床常见的致残性疾病,就目前来说,虽然周围神经损伤修复早已成为学者们研究的热点与难点,经过了不懈的努力,尝试了各种方法,仍没有发现理想的修复神经的方法。人羊膜是羊膜腔内表面的一层薄膜,来源方便,具有替代已受损神经细胞,修复受损神经;分泌神经营养因子,改善微环境,促进神经再生;抑制炎症反应,减少肉芽及瘢痕组织生成;不引起T细胞介导的特异性排斥反应的作用。本实验采用SD大鼠坐骨神经钳夹模型,对大鼠坐骨神经的损伤及其修复过程进行周期性的观察,并且应用羊膜包裹损伤的坐骨神经,观察羊膜对神经修复与再生的作用。  方法:选用90只150~200克的健康SD大鼠,雌雄不限,随机分成3组,A组(神经卡压处用羊膜包裹),B组(神经卡压处用医用几丁糖凝胶包裹),C组(不做任何处理)三组,每组20只。术后3天、1周、2周、4周、8周、12周行大体、光镜观察;于术后3天、1周、2周、4周、8周、12周取材,行免疫组化染色;术后2周、4周、8周取材,行透射电镜下观察;术后12周行大鼠足印分析,计算坐骨神经功能指数及恢复率,轴突成像分析,神经电生理检测。所有数据均进行统计学处理。  结果:  1. 大体观察:羊膜组大鼠术后肢体肿胀较轻,神经充血水肿轻,与周围组织粘连轻。  2. 光镜观察:羊膜组炎性反应小,成纤维细胞及新生血管少。  3. 电镜观察:羊膜组雪旺细胞内细胞器增生活跃,成纤维细胞及胶原产生少,修复时程比空白组短。  4. 免疫组化显示:羊膜组S-100蛋白表达较多,说明雪旺细胞增生活跃,并且S-100表达时间要久。  5. 轴突图像分析示:三组有髓纤维数量无明显差异(P>0.05),髓鞘厚度及有髓纤维直径相比较,羊膜组和几丁糖组要优于空白组(P<0.05),说明羊膜组有髓纤维成熟度要高。  6. 神经电生理刺激:三组神经传导速度比较无明显差异(P>0.05 ),波幅三组之间均有差异(P<0.05 ),羊膜组>几丁糖组>空白组,潜伏期羊膜组和几丁糖组无差异(P>0.05 ),短于空白组(P<0.05)。  7. 坐骨神经功能指数:羊膜组与几丁糖组坐骨神经功能恢复率要高于空白组(P<0.05)。  结论:羊膜可为神经修复提供相对稳定微环境,减少粘连,抑制炎性反应,促进雪旺细胞的增殖,促进神经的修复与再生,获得较好的治疗效果。羊膜在体内存留时间长,有利于神经再生和微环境的维持,刺激S-100分泌,利于神经再生与功能恢复,在这点上羊膜要优于几丁糖。本实验为羊膜治疗周围神经损伤提供了理论依据和动物实验基础。
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