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Wee1作为真核生物中调控细胞有丝分裂G2/M期过渡的重要激酶，它的功能可以被Cdc25磷酸酶所拮抗。如果细胞中的Wee1蛋白水平或者活性过高，细胞进入有丝分裂期延迟;而反之则G2期缩短，细胞提前进入有丝分裂期，因此在整个细胞周期中Wee1受到了非常精细地调控。高等生物中的研究表明，Wee1蛋白水平和稳定性受到了SCF的调控。为了研究裂殖酵母中参与调控Wee1激酶蛋白水平的细胞因子，本研究以裂殖酵母这一经典的单细胞真核生物为模式生物，开展了对有丝分裂G2/M过渡时期参与调控Wee1蛋白水平的因子的研究。 首先，我们研究了目前已知的裂殖酵母中的F-box蛋白对于Wee1激酶蛋白水平的影响。通过Dual-Luciferase检测系统测量这些F-box蛋白缺失或突变体细胞中Wee1的蛋白水平，我们筛选到了影响Wee1蛋白水平的F-box蛋白为Pof3和Pof1，并且发现当Pof3缺失或者Pof1突变时，细胞出现了G2/M过渡缺陷。 其次，我们还发现与高等生物类似，裂殖酵母中的CK2激酶也是参与对Wee1蛋白稳定性的调控。当CK2激酶缺失或突变时，细胞中Wee1蛋白水平升高;而当CK2过表达时，细胞中Wee1的蛋白水平下降。另外我们还尝试了寻找Wee1中潜在的CK2磷酸化位点，尽管目前我们还没有最终确定Wee1被CK2磷酸化的位点，但是我们通过GFP-GBP强制定位系统改变CK2激酶的亚细胞定位发现:虽然过多地把CK2定位于SPB上不能进一步降低CK2过表达细胞中的Wee1蛋白水平，但是将过表达的CK2强制定位于细胞核基质内会导致细胞中Wee1蛋白水平无法下降。 我们实验室已有的研究表明，核仁蛋白Dnt1参与负调控Wee1蛋白水平，但其机制不甚清楚。本研究发现Dnt1能够影响CK2催化亚基Cka1的定位，在dnt1△细胞中Cka1更多地集中到细胞核内而在胞质侧的SPB上定位减少，当在dnt1△细胞中表达入核序列突变的Dnt1时，我们发现Dnt1入核序列突变的细胞中Cka1在SPB上的定位同样比野生型的低。另外，我们还发现当CK2激酶被强制定位到SPB上时dnt1△突变体细胞中Wee1的蛋白水平被下调，说明Dnt1很有可能是通过调控CK2激酶在SPB上的定位来影响Wee1的蛋白水平的。