针刺长强穴治疗脑瘫的临床疗效及细胞凋亡机制

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目的:  观察针刺长强穴对脑瘫患儿粗大运动功能、日常生活能力和功能独立性能力的影响;评价针刺长强穴治疗脑瘫的安全性;观察针刺长强穴对脑瘫幼鼠海马Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响,探讨针刺长强穴治疗脑瘫的细胞凋亡机制。  方法:  1、临床研究:将64例脑瘫患儿随机分为针刺组和对照组,每组32例,针刺组在康复训练的基础上,采取针刺长强穴治疗,每周2次,共治疗24次。对照组仅做康复训练。以粗大运动功能测试量表(GMFM)、日常生活能力量表(ADL)和儿童功能独立性评定量表(WeeFIM)作为观察指标,在治疗前、治疗后和治疗后4周对针刺长强穴治疗脑瘫的临床疗效进行评价,并评价针刺长强穴治疗脑瘫的安全性。  2、实验研究:建立缺血缺氧脑瘫模型,将24只造模成功的脑瘫幼鼠随机分为模型组、针刺长强组(长强组)和针刺非穴组(非穴组),每组8只;并设立假手术组和空白组。采用悬吊试验和斜坡试验观察干预前后各组幼鼠行为学的变化,Morris水迷宫观察干预后各组幼鼠学习记忆能力的变化,并运用免疫组化技术观察干预后各纽幼鼠海马Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达情况。  结果:  1、临床研究:针刺组脱落1例。  (1)粗大运动功能测试量表(GMFM)  治疗前、治疗后和治疗后4周的GMFM总分比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。同一时间点,治疗前的GMFM总分两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后和治疗后4周的GMFM总分两组间比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。GMFM的D区(站立)和E区(走跑跳)评分比较,治疗前两组间差异无统计学意义(P>0.05);治疗后和治疗后4周评分两组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。  (2)日常生活能力量表(ADL)  治疗前、治疗后和治疗后4周的ADL评分比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。同一时间点,治疗前的ADL评分两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗前后ADL评分差值两组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后4周与治疗前的ADL评分差值两组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。  (3)儿童功能独立性评定量表(WeeFIM)  治疗前、治疗后和治疗后4周的WeeFIM评分比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。同一时间点,治疗前的WeeFIM评分两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗前后WeeFIM评分差值两组间比较,差异具有统计学意义(P<0.0l);治疗后4周与治疗前的WeeFIM评分差值两组间比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。  (4)安全性观察  未发现不良反应。  2、实验研究:  (1)行为学变化  ①采用缺血缺氧法建立脑瘫模型,脑瘫幼鼠悬吊试验表现为时间较正常幼鼠减少(P<0.01),斜坡试验表现为时间较正常幼鼠增加(P<0.01)。  ②脑瘫幼鼠经过针刺长强穴治疗后,悬吊时间增加(P<0.05),斜坡试验时间减少(P<0.01),水迷宫逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.05)。  (2) Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达变化  ①脑瘫幼鼠海马Bax和Caspase-3蛋白表达较正常幼鼠增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达减少(P<0.01)。  ②针刺长强穴可下调脑瘫幼鼠海马Bax和Caspase-3蛋白表达(P<0.01),非穴组与模型组比较无统计学意义(P>0.05);针刺长强穴可上调脑瘫幼鼠海马Bcl-2蛋白表达(P<0.01),非穴纽与模型组比较无统计学意义(P>0.05)。  结论:  1.针刺长强穴可提高脑瘫患儿粗大运动功能、日常生活能力和功能独立性能力;针刺长强穴治疗脑瘫未发现不良反应。  2.针刺长强穴可下调脑瘫幼鼠海马Bax和Caspase-3蛋白表达,上调海马Bcl-2蛋白表达,从而减少脑瘫幼鼠海马神经元细胞的凋亡;针刺长强穴治疗脑瘫的机制可能与调控海马细胞凋亡有关。
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