【摘 要】
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目的:百草枯（paraquat,PQ）为联吡啶类速效除草剂,广泛应用于农业生产,中毒事件日益增多,常规治疗效果差,病死率较高。本文分析影响PQ中毒预后的因素,进一步降低死亡率的必要条
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目的:百草枯（paraquat,PQ）为联吡啶类速效除草剂,广泛应用于农业生产,中毒事件日益增多,常规治疗效果差,病死率较高。本文分析影响PQ中毒预后的因素,进一步降低死亡率的必要条件,建立了大鼠血浆和组织中PQ的HPLC检测方法,旨在为PQ中毒治疗、预后提供试验依据。方法:1.样品处理:取血浆或组织匀浆5000rpm离心5min,取上清液0.5 mL置试管中,加入35%高氯酸100μL,漩涡1 min,低温高速(10800 r·min-1)离心5 min,取上清液20μL进样。2.色谱条件:DiamonsilTMC18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为0.1 mol·L-1磷酸缓冲液(含75 mmol·L-1庚烷磺酸钠)-乙腈（88:12,V/V）,用三乙胺调pH至3.0,检测波长为258 nm。结果:1.所建立的方法中血浆或组织中的内源性物质不干扰PQ的测定。2.在20～5000 ng·mL-1范围内线性良好,定量下限可达20ng·mL-1。方法绝对回收率为87.5%,RSD均小于3%（n=5）。批内、批间精密度实验RSD均小于7%（n=5）。方法相对回收率为99.1%,RSD均小于3%（n=5）。3.用该法测定大鼠血浆和组织中PQ浓度。大鼠灌胃给50mg·kg-1后8h血浆PQ浓度为360.3±130.9 ng·mL-1,至第3天则不能检出。大鼠灌胃给50mg·kg-1后,中毒3天内,由于肺泡组织对PQ具有主动摄取和蓄积特性,肺内PQ浓度下降幅度最小,在中毒24h时甚至升高,可能与肺纤维化形成有关;肾组织中PQ浓度最高,但下降最快,但3天后下降幅度明显放缓;与肺、肾组织相比,肝组织中PQ浓度最小。肺、肝至第14天不能检出PQ,而肾则至第28天不能检出。结论:1.在样本处理过程中,本实验采用高氯酸直接沉淀蛋白的方法处理血浆或组织样本,简便快捷,且沉淀完全,在检测中未见有干扰组分,且获得了较高的回收率,精密度及准确度考察结果均显示本方法符合生物样本分析测试的要求,适用于大鼠血浆和组织中PQ含量的测定。2.根据PQ的结构特点及化学性质,反相离子对HPLC可获得理想定量分析效果。本方法选用磷酸溶液作缓冲液,庚烷磺酸钠作离子对试剂,乙腈为有机溶剂,同时用有机碱三乙胺调节pH值。分析结果显示,PQ峰形良好,保留时间适当,分析过程简单易行。3.用本研究所建立的HPLC方法,检测大鼠PQ血浆或组织样本,可进一步探讨PQ中毒预后与PQ血浆或组织浓度的关系。
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