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二溴海因(1,3-dibromo-5,5-dimethylhydantoin,DBDMH)是一种新型杀菌消毒剂,在防治水产动物疾病中有很好的杀菌效果,目前在水产养殖中被广泛应用,被认为是最有前景的消毒剂。但药物在杀灭水体中有害病菌的同时可能在水生生物体内残留,进而对养殖对象的组织器官产生不同程度的毒副作用。鉴于此,本文以吉富罗非鱼为研究对象,设置不同剂量的二溴海因对其进行亚急性毒性试验,研究二溴海因在罗非鱼体内的动态消除规律,检测亚急性毒性试验中二溴海因对肝胰脏的抗氧化酶活性的影响,并对其肝胰脏进行组织切片观察,此外,还研究其对肝胰脏DNA的损伤情况,以此探讨二溴海因对吉富罗非鱼的毒理效应。研究结果如下:(1)二溴海因在罗非鱼体中的残留及其消解研究建立了以离子色谱法测定水产品中溴离子质量分数的方法,并用该方法检测了二溴海因作用于吉富罗非鱼后所产生的溴离子在肌肉中残留及消解的质量分数。检测时采用Cs 12A阴离子柱分离,电导检测,溴离子浓度为10～200 mg/kg,相关系数r2=0.9963。检测结果表明,1)不同添加水平下,该方法的回收率为82.58%～86.14%,相对标准偏差为4.61%～6.54%。因此,该方法可以应用于水产品中溴离子的定量分析;2)二溴海因浓度为0～0.3 mg/L时,肌肉中未检出溴离子;二溴海因浓度为1.5 mg/L时,暴露前4 d罗非鱼肌肉中溴离子的积累在同一水平,4～16 d肌肉中溴离子质量分数呈时间-效应关系,随时间的延长溴离子质量分数增加,第16 d时溴离子在肌肉中的质量分数达最大值21.6 mg/kg,符合国际食品法典的规定。在清水中恢复10 d后,肌肉中溴离子的质量分数降低。可见,实际生产中若二溴海因的施药剂量为0.3～0.4mg/L,则肌肉中溴离子质量分数对人类几乎没有威胁。(2)二溴海因对罗非鱼肝胰脏抗氧化系统的影响采用半静态水质接触染毒法,研究不同浓度(0、0.06、0.3、1.5 mg/L)、不同时间(1、2、4、8、16、26d)二溴海因对吉富罗非鱼肝胰脏总还原性谷胱甘肽(T-GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的影响。结果表明:肝胰脏 SOD、CAT、GPx 和 GSH/GSSG 在 0.06mg/L、0.3mg/L、1.5mg/L三个二溴海因暴露浓度下,随着暴露时间的延长表现为先被诱导后被抑制的变化趋势;肝胰脏GR、GST和T-GSH在0.06mg/L、0.3mg/L、1.5mg/L三个二溴海因暴露浓度下均被抑制。恢复试验结果表明持续给药0.06～1.5 mg/L二溴海因会对吉富罗非鱼造成不可逆损伤,且随二溴海因浓度增加,不可逆损伤加重。但实际生产中使用的二溴海因短时间内基本降解,所以损伤不大。(3)二溴海因对罗非鱼肝胰脏组织结构变化的影响采用H-E染色法对亚急性毒性试验的肝胰脏样本进行石蜡切片观察。结果发现:三个浓度暴露下罗非鱼肝胰脏组织损伤随暴露时间的延长而加重,并且肝胰脏组织损伤随二溴海因浓度的升高而增强,高浓度组对肝胰脏组织的损伤毒性作用明显高于低浓度组。损伤后主要表现为肝细胞肿胀、肝细胞水样变、肝细胞脂肪变、肝血窦淤血、肝中央静脉淤血等病状。恢复试验中各浓度组罗非鱼肝胰脏组织结构损伤都有所恢复,表明0.06 mg/L～1.5 mg/L二溴海因在短时间内(16 d)对罗非鱼肝胰脏组织结构造成可逆性损伤。实际生产中使用的二溴海因短时间内基本降解,所以损伤不大。(4)二溴海因对罗非鱼肝胰脏DNA损伤的影响二溴海因暴露第4天、8天、16天,采取罗非鱼肝胰脏组织,利用单细胞凝胶电泳技术立即测定二溴海因对肝胰脏的DNA损伤指标-尾部DNA量(TDNA%)、尾长(TL)、尾矩(TM)、Olive尾矩(OTM)。结果显示,肝胰脏DNA损伤程度随着暴露时间的增加逐渐加剧,在暴露第16天,DNA损伤最为严重。暴露短期内,与对照组相比,各剂量组DNA损伤差异不显著(P>0.05),暴露中期,低剂量组DNA损伤程度趋于平缓,高剂量组DNA损伤显著升高(P<0.05),到达暴露后期,随着暴露时间延长,DNA受损程度进一步加重,高剂量组表现一定的时间-效应关系。一定程度上,该研究显示了 DNA受损随着二溴海因剂量的增加及暴露时间的延长而不断加剧,体现了一定的剂量-效应关系和时间-效应关系。