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目的：缺血性心脏病是严重危害人类生命与健康的常见病和多发病，其关键问题是氧的供需不平衡导致的心肌缺氧及由血流障碍导致的营养供应不足和代谢产物堆积引发的心肌病变。因此，改善心肌缺血缺氧状态，减轻对心肌细胞的损伤具有重要治疗意义。羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A，HSYA）是从传统中药红花中提取的单体化合物。祖国医学认为红花活血祛瘀消肿，通畅血脉，消肿止痛，临床上多用于冠心病，肺心病，脑血栓等疾病的治疗。从红花中提取的水溶性有效成分红花黄色素（SY）也具有扩张血管、改善心肌供血、抑制血小板聚集、抑制血栓形成、抗氧化等多种药理作用。近年来发现在SY中HSYA含量较高，是发挥上述药理作用的有效单体成分。许多实验已经证实HSYA可以对抗自由基和血小板活化因子，具有抗脑缺血和神经保护的作用。但关于HSYA对心脏的直接作用研究甚少。本实验建立体外培养的心肌细胞缺氧模型观察HSYA对心肌的保护作用并探讨其作用机制。方法：取1～3 d龄Wistar大鼠，无菌条件下摘取心脏，剪碎组织，加入0.125％胰蛋白酶溶液、37℃消化4～6次，每次消化的上清液以含20％新生牛血清的DMEM培养液终止消化，静置后将上清液消化产物以1000r／min离心10min，弃去上清液后将细胞重悬于含20％小牛血清的DMEM培养液中差速培养两次，以1×105／ml的密度接种于培养板，置37℃、5％CO2培养箱中培养。24h后更换培养液并加入0.5μg／ml丝裂霉素抑制成纤维细胞生长，48h后弃去丝裂霉素，以正常培养基培养，每24h换液一次。（1）HSYA对缺氧心肌细胞的保护作用：将培养的心肌细胞随机分为正常对照、缺氧损伤、HSYA保护(共设1×10-6mol／L，1×10-7mol／L，1×10-8mol／L，1×10-9mol／L和1×10-10mol／L五组)以及地尔硫卓1×10-7mol／L组，同时设1×10-6mol／L HSYA正常对照组，以观察本实验中最高浓度的药物是否会对正常心肌细胞产生影响。缺氧损伤组以正常培养基培养2h后以无糖Hank’s液置换正常培养基，置于自制缺氧盒中通以高纯氮气（99％）并密闭培养3h，制备缺氧模型。各药物保护组先以含不同浓度HSYA或地尔硫卓的正常培养基培养2h，再更换为含药的无糖Hank’s液，置于缺氧盒中同样培养3h。1×10-6mol／L HSYA组只加入含药物的正常培养基培养5h。观察各组细胞形态学变化，计数细胞搏动频率，测定心肌细胞存活率、细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、细胞内的丙二醛（MDA）浓度以及ATP酶活性。（2）HSYA保护缺氧心肌细胞的作用机制探讨：将培养的心肌细胞随机分为正常对照、缺氧损伤、HSYA 1×10-7mol／L组、HSYA 1×10-8mol／L组及地尔硫卓1×10-7mol／L组。各组细胞处理同（1）。采用FURA2／AM荧光探针法测定各组细胞内游离Ca2+浓度，RT-PCR法观察心肌细胞肌浆网和质膜钙离子ATP酶的表达水平。结果：与缺氧损伤组比较，1×10-7mol／L和1×10-8mol／L HSYA组心肌细胞仍存在规律性搏动，细胞存活率显著升高（p＜0.01），细胞培养液中LDH漏出和心肌细胞内MDA的含量明显降低（p＜0.05，p＜0.01），而细胞内ATP酶的活性较缺氧损伤组显著增高（p＜0.01）。细胞内游离Ca2+浓度测定结果表明，此两种浓度的HSYA可明显降低心肌细胞内的Ca2+浓度（p＜0.01），与地尔硫卓组相比无统计学差异。RT-PCR实验结果证实，HSYA能增加心肌细胞质膜和肌浆网钙离子ATP酶的表达（p＜0.05，p＜0.01）。结论：1×10-7mol／L和1×10-8mol／L的HSYA对缺氧心肌细胞具有保护作用，表现为减轻缺氧所致的心肌细胞形态学损伤，减少细胞内LDH漏出，阻止MDA生成，提高细胞ATP酶活性，从而提高细胞存活率。此保护作用与增加心肌细胞肌浆网和质膜钙离子ATP酶的表达，从而减少缺氧所致的细胞内钙超载有关。