芽殖酵母PHO85基因和人新基因BRI3的功能研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vazumi126
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PHO85基因是芽殖酵母中的一个多功能基因.它参与了无机磷酸的代谢,碳源利用,糖原积累,特定蛋白的降解和细胞周期调控.该论文研究了酵母株YPH499及其衍生的pho85缺失株、pho80缺失株、papl(pcl7)缺失株在不同浓度的不同金属离子中的存活情况,结果表明和芽殖酵母YPH499相比,pho85缺失株和pho80缺失株表现出对K<+>、Mg<2+>、Zn<2+>、Ca<2+>和Mn<2+>的耐受下降,而PAPl基因的缺失则不会导致芽殖酵母对上述金属离子的敏感性的变化;而对Cu<2+>,三株突变株都表现出和YPH499相同的耐受性.同时,该文测定了各缺失株和YPH499对上述金属离子的半致死浓度以及pho85缺失株、pho80缺失株和YPH499的细胞总钙量.这些结果显示,Pho85蛋白激酶通过和Pho80而不是Pap1结合,参与了芽殖酵母K<+>、Mg<2+>、Zn<2+>、Ca<2+>和Mn<2+>离子平衡的调控.PHO85和PHO80基因的缺失损害了芽殖酵母钙的储存.我们用酵母双杂交系统3从人胎脑cDNA文库中5次重复地筛选到同一个编码Bri3结合蛋白的基因--CAML基因.Bram等的研究表明定位于内质网上的Caml蛋白在PMA存在下,通过激活Ca<2+>信号通路激活钙调磷酸酶,促进转录因子NFAT的入核的方式促进了TCR下游的IL-2等细胞因子转录激活.我们在HeLa细胞中过表达BRI3基因和CAML基因,并测定了PMA存在的情况下,胞内游离Ca<2+>的浓度,结果发现和CAML一样,BRI3基因的过表达也可以提高HeLa细胞内游离Ca<2+>浓度.这暗示了BRI3基因在胞内Ca<2+>信号调节中的作用.
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