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目的：观察补阳还五汤对 SD 大鼠脑缺血再灌注损伤(I/R)模型 ITGαvβ3 的表达及脑皮质区新生血管的影响。
方法：
1 制备补阳还五汤：参照本课题组前期研究的制备方法和质量控制标准。
2 采用“线栓法”制备SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型；利用大鼠脑立体定位仪右侧侧脑室注射重组人血管内皮抑制素(Recombinant Human Endostatin, RHE,恩度)制作抑制剂模型组；中药干预各模型组,制备模型前 3天开始给药,模型制备后14天给药结束,共17天；通过神经功能评分和 TTC染色的方法,比较正常对照组、假手术组、模型组、抑制剂组、中药组、中药+抑制剂组(联合组)大鼠脑缺血模型的梗死体积及神经功能变化。
3 用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中内皮生长因子(VEGF)、ITGαvβ3的含量,比较各组VEGF和 ITGαvβ3的变化。
4 用免疫组化法测定各组模型缺血侧大脑皮质区 VEGF及CD34的表达,分析VEGF及CD34阳性细胞数量,比较微血管密度(MVD)变化。
结果：
1 神经功能评分：中药组、联合组与模型组比较,大鼠神经功能缺损评分降低,差异显著(P<0.05)；抑制素组与模型组比较,抑制素组神经功能评分增高,差异显著(P<0.05)。
2 梗死体积：中药组、联合组与模型组比较梗死体积缩小,差异显著(P<0.05)；抑制素组与模型组比较,抑制素组梗死体积增大,差异显著(P<0.05)。
3 缺血侧大脑皮质区微血管密度：中药组、联合组与模型组比较微血管密度增多,差异显著(P<0.01)；抑制素组与模型组比较微血管密度降低,差异显著(P<0.05)。
4 缺血侧大脑皮质区VEGF表达：中药组、联合组与模型组比较VEGF表达升高,差异显著(P<0.01)；抑制素组与模型组比较,脑组织 VEGF表达降低,差异显著(P<0.05)。
5 血浆VEGF、ITGαvβ3表达：中药组、联合组与模型组比较VEGF、αvβ3表达升高,差异显著(P<0.05)；抑制素组与模型组比较VEGF表达降低,差异显著(P<0.05),αvβ3含量差异无显著性(P>0.05)。
结论：
1 补阳还五汤能够提高脑缺血大鼠模型神经功能评分,缩小梗死体积,促进缺血脑组织的修复。
2 血管内皮抑制剂能抑制脑组织VEGF表达水平和外周血浆VEGF、αvβ3含量,并抑制梗死边缘区微血管生成。
3 补阳还五汤对脑缺血的保护机制可能通过上调 VEGF、αvβ3表达,促使血管生成,改善脑循环,从而达到抗脑损伤作用。
4 补阳还五汤治疗脑缺血时作用靶点较多,除新生血管途径外,尚有其他途径抗脑缺血损伤。
5 通过侧脑室直接注射给药可减少药物在体内代谢,避开血脑屏障,且操作简便,死亡率低,有一定的实用性,在研究直接作用于脑组织的药物时,是一种理想的方法。