【摘 要】
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人类基因组测序计划顺利完成后，对众多基因的生物学功能进行分析和解释就成为后基因组时代的中心任务，由于基因的功能是由其产物——蛋白质来行使的，所以对基因的研究最终要回到
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人类基因组测序计划顺利完成后，对众多基因的生物学功能进行分析和解释就成为后基因组时代的中心任务，由于基因的功能是由其产物——蛋白质来行使的，所以对基因的研究最终要回到蛋白质研究上来。随着大量新的技术方法的提出以及仪器设备的发展，结构基因组学的提出和实施成为生命科学发展的必然趋势。跟随国际前沿，我们国家实施了造血干细胞结构基因组计划，笔者参与了造血干细胞结构基因组项目的部分研究工作，对三十多个基因进行了表达纯化摸索实验，对部分基因进行了表达载体构建和表达摸索实验，纯化了若干蛋白质样品，对若干蛋白质进行了晶体生长条件的摸索和优化。
hCyp33蛋白是第一个被发现的在一个蛋白上同时具有RNA结合区和PPIase功能区的蛋白。笔者对人源hCyP33蛋白进行了克隆表达实验，获得了可溶表达，进行了精细纯化并获得了大量高纯度蛋白质样品，摸索了晶体生长并获得了hCyP33蛋白C结构域的晶体，利用分子置换法解析了C结构域晶体结构，数据分辨率达到1.88埃。hCyP33蛋白C结构域与蛋白CypA具有高度的序列同源性，CypA是广泛分布的具有重要生物功能的蛋白。结构分析表明C结构域与CypA具有高度的结构保守性，具有CyP家族保守的B桶结构。推测hCyP33结构域也具有类似CypA的功能。C结构域具有PHase活性，其活性部位的疏水口袋能够为CsA所占据从而抑制其PPIase活性。CypA中的关键残基Ala103在C结构域中为Ser，推测此变化将对底物结合和酶活性产生一定影响。同时本文也推测C结构域能够与HIV-1的CA蛋白发生作用。
为了进一步工作的需要，对hCyP33蛋白做了三个截断体的克隆表达，N结构域和C结构域都单独得到了可溶表达并获得了精细纯化，进行了晶体生长实验，为进一步工作打下了基础。
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