东方百合离体诱变和耐盐突变体的筛选

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本试验采用60Coγ射线急性辐照,X射线慢性辐照,X射线急性辐照三种方法对东方百合索邦(Sorbonne)组织培养形成的不定芽进行辐照处理,研究了不同辐照方法的辐射生物学效应。并将辐射后的百合不定芽采用逐步提高盐浓度的方法进行耐盐突变体的筛选,获得了百合耐盐突变体,对耐盐突变体进行同工酶分析,测定了盐环境中耐盐突变体生理指标的动态变化,结果表明: 1.60Coγ射线辐照对东方百合不定芽的生长有抑制作用,60COγ射线处理东方百合索邦(Sorbonne)组培不定芽的适宜辐照剂量在2.0~4.0Gy之间,其半致死剂量为6.07Gy,半致矮剂量为5.21Gy。高剂量处理(≥4.0Gy) POD同工酶酶谱与对照差异大。 2.东方百合不定芽受X射线慢性辐照3个月后,辐照处理对东方百合不定芽的生长有显著性抑制作用,对不定芽增殖影响不明显,随着辐照剂量的增大,不定芽死亡率增大。不定芽POD同工酶发生了显著的改变,活性增强,条带数增多,X射线慢性辐照处理对东方百合不定芽诱变作用明显。 3.用X射线对东方百合组培不定芽进行了急性辐照处理,结果显示X射线急性辐照剂量偏低,辐照效应表现为刺激作用,促进了东方百合不定芽生长。 4.试验以百合健壮不定芽进行了确定百合耐盐临界浓度的预试验,根据植株的受害情况确定了东方百合耐NaCl临界浓度为0.75%。将百合辐照材料采取逐步提高盐浓度的方法进行耐盐突变体的筛选,共筛选到耐0.75%NaCl的突变体(T1)329个、耐1.0%NaCl的突变体(T2)139个、耐1.25%NaCl的突变体(T3)58个。试验发现三种辐照方法的耐盐诱变效果为γ射线急性辐照>X射线慢性辐照>X射线急性辐照。耐盐突变体同工酶分析发现突变体比对照多出了一些特异性同工酶带。耐盐突变体在盐环境中通过调节POD酶和SOD酶酶活性,降低了盐对细胞质膜的伤害,从而表现为对盐环境的适应性。 5.本研究筛选到能耐1.25%NaCl的东方百合耐盐突变体,远高于东方百合原品种的耐盐临界浓度(0.75%),耐盐性高。
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